[發明專利]DNA切割劑

在審

• 申請號: 201980090347.0
• 申請日: 2019-11-26
• 公開（公告）號: CN113614247A
• 公開（公告）日: 2021-11-05
• 發明（設計）人: K·V·謝韋里諾夫;S·A·什馬科夫;D·N·阿塔莫諾娃;I·I·高亞寧;O·S·穆沙羅娃;I·V·皮斯庫諾娃;I·V·費多羅娃;T·I·祖布科;M·A·霍多爾科夫斯基;G·E·波貝加洛夫;A·N·阿爾謝尼涅夫;P·A·賽爾科娃;A·A·瓦西列娃;T·O·阿塔莫諾娃;M·V·阿布拉莫娃
• 申請（專利權）人: 拜奧卡德聯合股份公司
• 主分類號: C12Q1/6883
• 分類號: C12Q1/6883;C12N15/11
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司 72001
• 代理人: 李志強;黃希貴

1.蛋白質用于在DNA分子中形成緊在所述DNA分子中的核苷酸序列5’-NN(G/A)NA(C/T)N-3’之前定位的雙鏈斷裂的用途，所述蛋白質包含SEQ ID NO: 1的氨基酸序列，或包含與SEQ ID NO: 1的氨基酸序列具有至少95%同一性，且與SEQ ID NO: 1的差別僅在于非保守氨基酸殘基的氨基酸序列。

2.根據權利要求1的用途，其特征在于所述雙鏈斷裂在35℃至37℃的溫度下以及在Mn2+離子的存在下，在DNA分子中形成。

3.根據權利要求1的蛋白質的用途，其中所述蛋白質包含SEQ ID NO: 1的氨基酸序列。

4.用于在與序列5’-NN(G/A)NA(C/T)N-3’直接毗鄰的單細胞生物或多細胞生物的基因組DNA序列中生成雙鏈斷裂的方法，其包括將有效量的以下物質引入所述生物的至少一個細胞內：a)包含SEQ ID NO: 1的氨基酸序列的蛋白質或編碼包含SEQ ID NO: 1的氨基酸序列的蛋白質的核酸，以及b)包含與直接毗鄰核苷酸序列5’-NN(G/A)NA(C/T)N-3’的生物的基因組DNA區域的核苷酸序列形成雙鏈體，并且在雙鏈體形成后與所述蛋白質相互作用的序列的引導RNA，或編碼所述引導RNA的DNA序列，

其中所述蛋白質與所述引導RNA和核苷酸序列5’-NN(G/A)NA(C/T)N-3’之間的相互作用，導致在直接毗鄰序列5’-NN(G/A)NA(C/T)N-3’的基因組DNA序列中形成雙鏈斷裂。

5.根據權利要求4的方法，其進一步包括與引導RNA同時引入外源DNA序列。