[發明專利]酶促核酸分子

在審

• 申請號: 201980085501.5
• 申請日: 2019-10-31
• 公開（公告）號: CN113302200A
• 公開（公告）日: 2021-08-24
• 發明（設計）人: G·布魯克;A·馬爾科;A·派因
• 申請（專利權）人: 埃塞克斯大學企業有限公司
• 主分類號: C07K14/47
• 分類號: C07K14/47;C12N15/113
• 代理公司: 廣州嘉權專利商標事務所有限公司 44205
• 代理人: 黃琳娟

本發明的某些方面涉及用于治療前列腺癌的方法和試劑。本發明還包括酶促核酸分子(“DNA酶”)，其包含催化核心和兩個與雄激素受體mRNA分子中包含的核酸序列互補的特異性結合臂。還包括包含酶促核酸分子的組合物以及治療疾病例如前列腺癌的方法，所述方法包括使用這樣的核酸分子。

技術領域

本發明的某些方面涉及用于治療前列腺癌的方法和試劑。本發明還包括酶促核酸(enzymatic nucleic acid)分子(“DNA酶”)，其包含催化核心和兩個與雄激素受體mRNA分子中包含的核酸序列互補的特異性結合臂。還包括包含酶促核酸分子的組合物以及治療疾病例如前列腺癌的方法，其包括使用這樣的核酸分子。

背景技術

前列腺癌是男性中最常見的癌癥診斷，并且仍然是男性死亡的第三大主要原因。在英國，每天有平均130例新診斷的前列腺癌病例，使其成為第二大最常見的癌癥。到2035年，英國的前列腺癌發病率預計將上升12％。當前的治療方法包括外科手術，其通常與放射治療并且在晚期癌癥階段與激素治療和化學治療相結合。激素治療的更多細節在下文提供。

雄激素和雄激素受體(AR)在雄性表型的表達中起著關鍵作用。雄激素與雄激素受體締合，雄激素受體是配體依賴性的轉錄因子。在與細胞質中的雄激素締合后，就會發生雄激素受體易位進入細胞核和二聚化。在細胞核內，激活的雄激素受體與稱為激素響應元件的特定的DNA序列結合。雄激素受體信號傳導途徑最終導致特定基因的上調或下調。

前列腺癌與雄激素受體功能的改變有關。雄激素受體信號傳導途徑是許多癌癥，尤其是前列腺癌的生長中的基本過程。當前治療前列腺癌的方法利用這種雄激素依賴性通過破壞信號傳導途徑來抑制腫瘤生長。

由于雄激素受體可能會經歷選擇性剪接事件或發生有利于癌癥生長的突變，因此仍可能發生對這些治療的抗性。因此，設計新的治療策略以下調多種形式的雄激素受體并破壞信號傳導途徑是最重要的。已經設計了最近的治療策略來使用核酶和反義分子下調雄激素受體。

激素治療也可以單獨用于不適合手術的局部前列腺癌患者。激素治療被用來阻止雄激素的產生或作用。當前用于前列腺癌的治療方案導致多種副作用，例如降低的骨礦物質密度、增加的骨質疏松性脆性骨折的風險、體重增加和疲勞，從而導致患者的生活質量大幅降低。

用于前列腺癌的激素治療，特別是雄激素剝奪治療(deprivation therapy)，在大多數病例中最初是有效的。但是，患者隨后復發并發展出更具侵襲性的去勢抗性形式的前列腺癌并不少見，這使得進一步的激素治療無效。因此，非常需要針對治療抗性疾病的新治療策略以及前線治療。

還認為雄激素受體(AR)介導的雄激素作用也可能在雌性生殖生理中起作用。提出雄激素受體的剪接變體在多囊卵巢綜合征(PCOS)中具有病因學作用。

酶促核酸分子(也稱為脫氧核酶、DNA酶或DNAzyme)是由單鏈脫氧核糖核酸聚合物構成的合成催化劑，其可分類為10-23或8-17酶促核酸。酶促核酸由側翼是兩個特異性序列的催化核心組成，并且具有折疊成復雜二級結構的能力。催化核心通常需要二價陽離子(例如Mg2+、Ca2+、Pb2+)作為催化活性的輔助因子。目前，DNA酶具有廣泛的催化功能，一種最常見的是核糖核酸酶活性。酶促核酸的核糖核酸酶活性由通過酸堿催化機制發生的酯基轉移反應進行。酶促核酸分子的催化活性可能需要輔因子(即在酯基轉移反應中充當堿的二價陽離子)的存在。二價陽離子介導靶標RNA的相鄰磷酸二酯鍵處的2’-羥基的親核攻擊。

具有核糖核酸酶活性的酶促核酸分子通過側翼序列與靶標mRNA的Watson和Crick堿基配對識別其靶標。側翼序列對靶標的堿基互補性識別允許選擇和設計針對特定靶標的酶促核酸，并且因此對特定mRNA進行催化?？梢允褂妹复俸怂岱肿拥奶禺愋詠硗ㄟ^其轉錄物的降解來調節特定基因的表達，并且因此控制某些細胞途徑，特別是在疾病狀態下被破壞的那些。