[發明專利]用于基于血液成分制備藥物制劑的方法

在審

• 申請號: 201980069941.1
• 申請日: 2019-08-22
• 公開（公告）號: CN112955159A
• 公開（公告）日: 2021-06-11
• 發明（設計）人: P·韋林;J·賴內克;J·海因德克
• 申請（專利權）人: 奧索根股份公司
• 主分類號: A61K35/14
• 分類號: A61K35/14;A61K35/18;A61K35/19;A61K35/12;A61P19/08;A61P19/02;A61P19/04;A61P29/00;A61P25/00;A61P37/02;A61P17/06;A61P3/10;A61P17/02;A61P21/00
• 代理公司: 北京市磐華律師事務所 11336
• 代理人: 馮永貞

本發明涉及一種制備藥物組合物的方法，包括以下步驟：提供從哺乳動物收集的液體，液體包含血液的細胞成分；提供具有內表面的容器；使液體與內表面接觸；將與內表面接觸的液體培育持續一培育時間，其中在培育時間期間使用攪拌裝置將液體攪拌至少一次，并且在經過培育時間之后，通過包括(1)收集液體或(2)從液體中除去部分或全部的細胞成分并收集其余部的步驟獲得藥物組合物。

背景技術

條件血清(CS)是從條件外周全血制備的生物藥物組合物。自體條件血清(ACS)是向同一血液供體的人給藥的CS。CS具有抗炎和可能的軟骨保護特性。使用CS(ACS)的療法依賴于細胞因子和在導致某些因子積累的血液調節(即血液的與表面接觸的培育)時形成的其他因子。這通常是在玻璃珠存在的情況下進行的。自1990年代以來，ACS已經開始使用，最初主要用于骨關節炎和其他骨科疾病，諸如類風濕性關節炎和(退行性)脊柱障礙，在這些疾病中，ACS已經顯示出對病癥和疾病進展的有益療效。通常，將來自患者的血液抽入容納有玻璃珠的無熱源注射器中，以開始細胞(特別是白細胞，諸如單核細胞)的激活。在培育后，回收血液并通過離心除去細胞。所得血清富含抗炎細胞因子，諸如白介素(IL)-1受體拮抗劑(IL-1Ra)、IL-4、IL-10和IL-13，以及多種生長因子，包括胰島素類生長因子-1，血小板衍生生長因子和轉化生長因子-β1，并且血清諸如通過關節內注射返回至同一患者，例如進入受影響區域。IL-1Ra是細胞因子IL-1的天然存在的抑制劑。IL-1被認為是炎癥、疼痛和組織破壞的重要介質。

在骨科疾病的發病中，生物力學因子發揮了作用。此外，在發病機理中，整個細胞因子級聯的激活是重要的。一個關鍵的過程是影響透明軟骨破壞的細胞因子的局部釋放。這導致促炎因子和破壞性因子的額外產生，并因此進一步導致透明軟骨破壞。由于IL-1β是許多炎癥和退行性疾病的關鍵介質，因此治療策略著重于抵消其生物活性。抑制IL-1β作用的制劑具有高的治療潛力。各種方法是施用例如IL-1Ra、可溶形式的IL-1受體和抗炎細胞因子，諸如IL-4、IL-10和IL-13，其抑制IL-1的合成，增加IL-1Ra的合成，或兩者。IL-1Ra有競爭力地抑制IL-1β，并且對I和II型IL-1受體具有親和力。重組IL-1Ra被美國FDA批準用于類風濕性關節炎的治療。假設在退行性疾病中局部IL-1Ra濃度過低，無法抑制軟骨、肌肉、脊柱組織和其他關節結構的破壞。

ACS是一種可以改變骨關節炎發展過程(DMOAD)的藥物，因此可能延遲甚至阻止對手術干預(諸如全關節置換)的需求。ACS已經顯示出在骨關節炎的臨床益處，骨關節炎諸如膝骨關節炎、顳下頜關節骨關節炎、髖骨關節炎和髖關節病等，并且在前交叉韌帶重建手術后減小骨隧道拓寬。在動物模型和研究以及人類臨床研究中，將ACS注射進入患病組織中也已經顯示出對于治療腰椎管狹窄、椎間盤突出和肌肉損傷的臨床有效性和安全性。它在許多發炎病癥(諸如神經炎癥)中具有潛力。因此，它是減少疼痛，抑制組織退化和支持組織恢復的有用的非手術技術。

已有越來越多的證據表明，不僅IL-1Ra，而且其他因子也可能涉及CS(ACS)的臨床療效。IL-1Ra與IL-1的比例作為條件血液的質量控制參數也是有用的，該比例應至少為10：1，優選地至少為100：1。假設ACS的臨床的和臨床前的療效可能歸因于ACS中存在的多種因子的協同作用。療效可能部分是由于通過將血細胞暴露于異體表面而激活內源性傷口愈合機制、誘導機制，諸如凝血級聯和組織修復。可以通過重新建立健康的關節穩態來試驗性地解釋在骨關節炎中的長期療效(例如，延長超過例如兩年)。由于ACS的自體性質，因此風險/益處比例極佳，且無副作用必定是預料中的。

眾所周知，全血和條件全血都包含外泌體。外泌體是小囊泡，其中細胞分泌至小囊泡的環境中。例如，諸如血清、尿液、唾液、腹膜液、腦脊液和滑膜液的生物液包含外泌體。CS也包含外泌體。已研究的大多數類型的細胞都能分泌外泌體。分泌通過穿過/從細胞的質膜釋放而發生。根據制備它們的細胞類型，外泌體尤其包含蛋白質的可變組合。用于制備和施用外泌體的方法被描述于例如WO 2006/007529 A2中。