[發明專利]嵌合分子

在審

• 申請號: 201980068875.6
• 申請日: 2019-10-18
• 公開（公告）號: CN112930355A
• 公開（公告）日: 2021-06-08
• 發明（設計）人: J·基西洛;F·J·奧伯梅爾;M·科普夫
• 申請（專利權）人: 蘇黎世聯邦理工學院
• 主分類號: C07K14/73
• 分類號: C07K14/73;C07K14/705
• 代理公司: 北京智信禾專利代理有限公司 11637
• 代理人: 吳肖肖

本發明涉及同時檢測和富集抗原特異性T細胞和被其T細胞受體(TCR)特異性識別的肽的方法。該方法還允許鑒定T細胞特異性抗原，用于體內和/或體外干預(包括疫苗接種、誘導免疫耐受、阻斷TCR和MHC?介導的毒素遞送)，用于免疫原性測試和其他體外T細胞反應性測試。本發明還涉及在所述方法中使用的嵌合分子。

技術領域

本發明涉及同時檢測和富集抗原特異性T細胞和被其T細胞受體(TCR)特異性識別的肽的方法。該方法還允許鑒定T細胞特異性抗原，用于體內和/或體外干預(包括疫苗接種、誘導免疫耐受、阻斷TCR和MHC-介導的毒素遞送)，用于免疫原性測試和其他體外T細胞反應性測試。本發明還涉及在所述方法中使用的嵌合分子。

背景技術

隨著富裕社會中醫學進入個性化的新時代，大多數療法和醫療產品正在逐步針對個人患者量身定制。在免疫療法的情況下，T細胞的抗原特異性成為關注焦點，對其無偏差且有效的鑒定至關重要。

特別地，基于腫瘤特異性抗原(TSA)的癌癥疫苗的開發是現代醫學的主要目標之一。

腫瘤特異性肽，即所謂的新生抗原，僅存在于腫瘤細胞中，而正常組織中則完全不存在。這樣的腫瘤特異性肽是由導致形成新的蛋白質序列的腫瘤特異性DNA改變產生的。在MHC的背景下，腫瘤特異性肽在腫瘤細胞和所謂的抗原呈遞細胞(APC)的表面上展示。樹突狀細胞或巨噬細胞等APC可以通過吞噬作用或受體介導的內吞作用使抗原內在化。MHC分子在以短線性肽形式向T細胞呈遞細胞抗原方面起著重要作用。它們與存在于T細胞表面的T細胞受體(TCR)相互作用，從而導致T細胞激活。MHC由α和β鏈以及結合在由這些鏈形成的槽中的肽組成。該復合體的穩定性高度依賴于肽結合，因此空的MHC分子從細胞表面被下調并降解。然而，空的MHC分子存在于細胞表面，可以結合細胞外肽并將其呈遞給T細胞。

一旦腫瘤特異性肽出現在細胞表面，該細胞便可能被免疫系統識別并破壞。因此，含有腫瘤特異性肽的疫苗可以刺激免疫系統以檢測和破壞在其表面呈遞這些分子的癌細胞。

T細胞受體(TCR)以低親和力結合肽-主要組織相容性復合體(pMHC)，這對直接鑒定T細胞同源肽(表位)構成了巨大挑戰。已經開發出幾種不同的方法來解決該問題，但它們都有一個很大的缺點：它們嚴重限制了并行處理，并且不允許同時針對多個表位篩選多個TCR。必須針對表位文庫逐一篩選感興趣的TCR。反之亦然，在發現對目標表位具有反應性的TCR時，需要針對TCR文庫逐一篩選這些表位。

因此，需要提供一些手段和方法，用于同時檢測和富集抗原特異性T細胞和由其TCR特異性識別的肽，以及鑒定用于體內和/或體外干預的T細胞特異性抗原。本發明現在通過提供這樣的手段和方法滿足了這種需求，并在權利要求和本發明的以下實施例中更具體地定義了這些手段和方法。

發明內容

A1、一種嵌合分子，其包含CD4、LAG3或CD8共受體蛋白和與共受體N-末端連接的肽。

A2、根據實施方案A1的所述嵌合分子，其中所述肽或所述肽的一部分可以由主要組織相容性復合體呈遞。

A3、根據實施方案A1或A2的所述嵌合分子，其中所述肽具有6-200個氨基酸殘基的長度。

A4、根據實施方案A1至A3中任一項的所述嵌合分子，其中所述肽具有7-30個氨基酸殘基的長度。

A5、根據實施方案A1至A4中任一項的所述嵌合分子，其中所述肽是隨機肽。

A6、根據實施方案A1至A5中任一項的所述嵌合分子，其中所述肽是由給定DNA或cDNA分子編碼的肽。

A7、根據實施方案A6的所述嵌合分子，其中編碼所述肽的DNA或cDNA分子是通過較大的DNA或cDNA分子的片段化獲得的。

A8、根據實施方案A1至A7中任一項的所述嵌合分子，其中所述肽源自腫瘤細胞或已被病原體感染的細胞。