[發明專利]用于激活和擴增嵌合抗原受體-修飾的免疫細胞的蛋白L

在審

• 申請號: 201980061485.6
• 申請日: 2019-09-19
• 公開（公告）號: CN112739816A
• 公開（公告）日: 2021-04-30
• 發明（設計）人: M·沃德亞恩科;E·麥克勞德;張新;王文波
• 申請（專利權）人: 富士膠片細胞動力公司
• 主分類號: C12N5/0783
• 分類號: C12N5/0783;A61K35/17
• 代理公司: 中國貿促會專利商標事務所有限公司 11038
• 代理人: 陳曉娜

1.一種體外激活和/或擴增CAR-修飾的免疫細胞的方法，所述方法包括：

(a)獲得CAR-修飾的免疫細胞的起始群體；以及

(b)在蛋白L的存在下培養CAR-修飾的免疫細胞的所述群體持續以產生激活的和/或擴增的CAR-修飾的免疫細胞的群體的足夠時間。

2.根據權利要求1所述的方法，其中所述蛋白L被包被在培養表面上。

3.根據權利要求2所述的方法，其中所述培養表面是培養板、培養瓶、微載體、微粒、水凝膠顆粒或培養袋。

4.根據權利要求2所述的方法，其中所述培養在缺少抗-CD3抗體和/或抗原-特異性靶細胞的情況下進行。

5.根據權利要求1所述的方法，其中所述CAR-修飾的免疫細胞是T細胞、NK細胞、樹突狀細胞和/或巨噬細胞。

6.根據權利要求5所述的方法，其中所述T細胞是CD8⁺T細胞、CD4⁺T細胞、αβT細胞或γδT細胞。

7.根據權利要求6所述的方法，其中所述方法進一步包括選擇CD8⁺T細胞。

8.根據權利要求1所述的方法，其中所述CAR-修飾的免疫細胞是同種異體的。

9.根據權利要求1所述的方法，其中所述CAR-修飾的免疫細胞是自體的。

10.根據權利要求1所述的方法，其中所述CAR-修飾的免疫細胞來源于多能干細胞(PSC)。

11.根據權利要求10所述的方法，其中所述PSC是誘導性多能干細胞(iPSC)。

12.根據權利要求11所述的方法，其中所述iPSC由血細胞重編程。

13.根據權利要求11所述的方法，其中所述iPSC由T細胞重編程。

14.根據權利要求11所述的方法，其中所述iPSC經附加體重編程。

15.根據權利要求1所述的方法，其中所述CAR-修飾的免疫細胞來源于原代外周血單核細胞(PBMC)或原代造血干細胞。

16.根據權利要求10-14中任一項所述的方法，其中所述iPSC通過細胞因子定向分化而分化成CD34⁺祖細胞。

17.根據權利要求10-14中任一項所述的方法，其中所述iPSC通過正向編程而分化CD34⁺祖細胞。

18.根據權利要求1所述的方法，其中所述CAR包含選自由F(ab’)2、Fab’、Fab、Fv和scFv組成的組的抗原結合結構域。

19.根據權利要求1所述的方法，其中所述CAR包含CD28共刺激結構域和CD3ζ信號傳導結構域。

20.根據權利要求2所述的方法，其中所述培養表面進一步用重組纖連蛋白、纖連蛋白或VCAM1包被。

21.根據權利要求20所述的方法，其中所述重組纖連蛋白的濃度為0.1-1μg/cm²。

22.根據權利要求20所述的方法，其中所述重組纖連蛋白的濃度為0.5μg/cm²。