[發(fā)明專利]用于檢測抗藥抗體的方法

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• 申請?zhí)枺?/td>: 201980051334.2
• 申請日: 2019-08-02
• 公開（公告）號: CN112534263A
• 公開（公告）日: 2021-03-19
• 發(fā)明（設計）人: 徐衛(wèi)鋒;R·C·佩魯特拉
• 申請（專利權(quán)）人: 百時美施貴寶公司
• 主分類號: G01N33/564
• 分類號: G01N33/564;G01N33/574
• 代理公司: 北京坤瑞律師事務所 11494
• 代理人: 封新琴

1.一種用于檢測樣品中的抗藥抗體(ADA)的方法，其包括：

a)在高溫下預處理所述樣品以解離所述樣品中的ADA:藥物免疫復合物；

b)通過基質(zhì)從所述樣品中分離出所述ADA；

c)使用緩沖液從所述基質(zhì)中回收所述ADA；以及

d)在基于細胞的測定或體外測定中檢測所述ADA。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述高溫在60℃與68℃之間。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述高溫為約60℃、61℃、62℃、63℃、64℃、65℃、66℃、67℃或68℃。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中將所述樣品在所述高溫下預處理約30分鐘與2小時之間的時間。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述ADA對酸處理敏感。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述藥物具有比所述ADA低的熱穩(wěn)定性。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述藥物選自抗體或其片段、核酸、肽、多肽、擬肽、碳水化合物、脂質(zhì)或小分子化合物。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述樣品是選自以下的生物樣品：體液、粘液分泌物、唾液、血液、全血、血漿和血清。

9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中通過與生物素化的藥物接觸，然后與鏈霉親和素包被的基質(zhì)接觸，從所述樣品中分離出所述ADA。

10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中通過與所述藥物偶聯(lián)的基質(zhì)從所述樣品中分離出所述ADA。

11.根據(jù)權(quán)利要求9-10中任一項所述的方法，其中所述基質(zhì)是磁珠。

12.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中在基于細胞的測定中檢測所述回收的ADA。

13.根據(jù)權(quán)利要求12所述的方法，其包括：i)在所述藥物的存在下將所述回收的ADA添加到細胞中；以及ii)通過測量所述藥物對所述細胞的活性降低來檢測所述ADA。

14.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中在體外測定中檢測所述回收的ADA。

15.根據(jù)權(quán)利要求14所述的方法，其包括：i)使所述回收的ADA與用可檢測標記物標記的所述藥物接觸；以及ii)通過測量所述可檢測標記物來檢測所述ADA。

16.根據(jù)權(quán)利要求15所述的方法，其中所述可檢測標記物是選自以下的標記物：放射性同位素、酶、熒光標記物、化學發(fā)光標記物和電化學發(fā)光標記物以及用于酶促檢測反應的底物。

17.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述藥物是結(jié)構(gòu)域抗體。

18.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述藥物是聚乙二醇化的。

19.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述藥物是魯利珠單抗。

20.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述高溫為約62℃。

21.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述樣品是血清。

22.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述樣品來自已經(jīng)用所述藥物治療過的受試者。