[發明專利]可活化白介素12多肽及其使用方法

在審

• 申請號: 201980047307.8
• 申請日: 2019-05-14
• 公開（公告）號: CN112654636A
• 公開（公告）日: 2021-04-13
• 發明（設計）人: W·溫斯頓;D·希克林;V·巴斯卡爾;L·葉夫寧;P·博伊爾勒;J·A·薩爾梅隆加西亞;H·布羅德金;H·韋舍;S·J·林;C·塞得-杜根
• 申請（專利權）人: 狼人治療公司
• 主分類號: C07K14/55
• 分類號: C07K14/55;A61K38/00;C07K19/00
• 代理公司: 北京戈程知識產權代理有限公司 11314
• 代理人: 程偉

1.一種融合多肽，其具有下式：

[A]-[L1]-[D]or[A]-[L1]-[D]-[L2]-[B]or[B]-[L1]-[A]-[L1]-[D]

其中

A是白介素12(IL-12)多肽；

B是半衰期延長元件；

L1和L2各自獨立地是多肽接頭，其中L1是蛋白酶可裂解的多肽接頭并且L2是任選地蛋白酶可裂解的多肽接頭；

D是IL-12阻斷部分；并且

所述融合多肽是減弱的IL-12受體激動劑，但在(i)裂解所述L1蛋白酶可裂解的多肽接頭后或者(ii)在L2為蛋白酶可裂解的多肽接頭時裂解L1和L2二者后，所產生的所述融合多肽的所述含有IL-12多肽的片段為具有與天然存在的IL-12多肽相當的效力和半衰期的IL-12受體激動劑。

2.一種融合多肽，所述融合多肽包含以下每一種中的至少一種：

a)白介素12(IL-12)多肽[A]；

b)IL-12阻斷部分[D]；和

c)蛋白酶可裂解的多肽接頭[L]；并且

其中所述IL-12多肽和所述IL-12阻斷部分通過所述蛋白酶可裂解的多肽接頭可操作地連接，并且所述融合多肽具有減弱的IL-12受體活化活性，其中所述融合多肽的所述IL-12受體活化活性比含有通過裂解所述蛋白酶可裂解的多肽接頭而產生的所述IL-12多肽的所述多肽的所述IL-12受體活化活性小至少約10倍。

3.如權利要求2所述的融合多肽，其中[A]為所述融合多肽的N端。

4.如權利要求1至3中任一項所述的融合多肽，其中[A]具有下式：

[A1]-[L3]-[A2]或[A2]-[L3]-[A1]，其中

A1為IL-12p40亞基多肽；

A2為IL-12p35亞基多肽；并且

L3為任選地蛋白酶可裂解的多肽接頭。

5.如權利要求4所述的融合多肽，其中[A]具有式[A1]-[L3]-[A2]，并且L3不是蛋白酶可裂解的。

6.如權利要求1至5中任一項所述的融合多肽，其中含有所述裂解的多肽的片段的所述IL-12多肽的所述激動劑活性與所述未裂解的融合多肽的所述激動劑活性相比增加至少10倍。

7.如權利要求6所述的融合多肽，其中所述激動劑活性使用HEK Blue報告基因細胞測定來評定。

8.如權利要求1至7中任一項所述的融合多肽，其中每種蛋白酶可裂解的多肽接頭獨立地包含能夠被選自由以下組成的組的蛋白酶裂解的序列：激肽釋放酶、凝血酶、糜酶、羧肽酶A、組織蛋白酶G、組織蛋白酶L、彈性蛋白酶、PR-3、顆粒酶M、鈣蛋白酶、基質金屬蛋白酶(MMP)、成纖維細胞活化蛋白(FAP)、ADAM金屬蛋白酶、纖溶酶原活化劑、組織蛋白酶、半胱天冬酶、類胰蛋白酶和腫瘤細胞表面蛋白酶。

9.如權利要求8所述的融合多肽，其中每種蛋白酶可裂解的多肽獨立地包含同一蛋白酶的兩個或更多個裂解位點或被不同蛋白酶裂解的兩個或更多個裂解位點，或者所述蛋白酶可裂解的多肽中的至少一種包含兩種或更多種不同蛋白酶的裂解位點。

10.如權利要求1至9中任一項所述的融合多肽，其中IL-12阻斷部分抑制所述融合多肽對所述IL-12受體的活化。

11.如權利要求1至10中任一項所述的融合多肽，其中所述IL-12阻斷部分非共價結合至所述IL-12多肽。

12.如權利要求1至11中任一項所述的融合多肽，其中所述IL-12阻斷部分結合所述IL-12p40亞基多肽。

13.如權利要求1至11中任一項所述的融合多肽，其中所述IL-12阻斷部分結合所述IL-12p35亞基多肽。