[發(fā)明專利]博萊霉素用于模擬電離輻射對(duì)T細(xì)胞的效應(yīng)

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201980044038.X
• 申請(qǐng)日: 2019-06-07
• 公開（公告）號(hào): CN112368578A
• 公開（公告）日: 2021-02-12
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: A·托羅;C·弗朗
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 諾瓦格雷公司
• 主分類號(hào): G01N33/50
• 分類號(hào): G01N33/50;G01N33/68
• 代理公司: 北京戈程知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11314
• 代理人: 程偉

本發(fā)明涉及一種用于模擬電離輻射對(duì)細(xì)胞效應(yīng)的方法，其中所述細(xì)胞與博萊霉素接觸。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及電離輻射對(duì)細(xì)胞，特別是對(duì)淋巴細(xì)胞的效應(yīng)的測定。更具體地說，本發(fā)明涉及在不使用電離輻射的情況下，模擬電離輻射對(duì)細(xì)胞效應(yīng)的方法。本發(fā)明的方法特別可用于在電離輻射治療/輻射療法治療之前評(píng)估受試者的個(gè)體輻射敏感性。

背景技術(shù)

電離輻射治療是腫瘤學(xué)的主要治療方式之一，50％以上的診斷具有癌癥的患者在其治療過程中接受過電離輻射治療。雖然通過電離輻射的治療主要是局部治療，但患者在治療區(qū)域(尤其是腫瘤周圍組織中)暴露于毒性的風(fēng)險(xiǎn)中，其可發(fā)展為急性(即，在前3個(gè)月)或晚期(即，在治療之后超過3個(gè)月以上)。因?yàn)榛謴?fù)可能不完全，嚴(yán)重的急性毒性可能會(huì)具有晚期后果。此外，晚期毒性可能會(huì)隨著時(shí)間的推移而發(fā)生，并經(jīng)常持續(xù)存在，在癌癥幸存者中對(duì)生活質(zhì)量產(chǎn)生重大負(fù)面影響。

已知有許多因素會(huì)增加輻射誘導(dǎo)毒性的風(fēng)險(xiǎn)，包括個(gè)體輻射敏感性(Azria，Betz等人，2012年)。雖然對(duì)患者群體的毒性風(fēng)險(xiǎn)是已知的，但在治療前很難確定個(gè)體正常組織的輻射敏感性。因此，目前的實(shí)踐標(biāo)準(zhǔn)通常根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)建議中的臨床情景來規(guī)定輻射劑量，而不考慮待輻射個(gè)體的基因型或表型。

此前，基于對(duì)RILA(輻射誘導(dǎo)T-淋巴細(xì)胞凋亡)的流式細(xì)胞術(shù)評(píng)估，開發(fā)輻射敏感性診斷測試。這項(xiàng)診斷測試被描述為具有明顯的潛力用于選擇可能對(duì)電離輻射治療顯示出增加的毒性概率的個(gè)體(Ozsahin，Crompton等人2005年)。

然而，RILA測試涉及到用電離輻射處理細(xì)胞的步驟。因此，在沒有配備細(xì)胞輻射器、沒有被授權(quán)使用這種設(shè)備的標(biāo)準(zhǔn)醫(yī)學(xué)分析實(shí)驗(yàn)室中，可能不會(huì)容易和常規(guī)地實(shí)施RILA測試。

WO 2014/154854公開了用于模擬電離輻射對(duì)T細(xì)胞(T淋巴細(xì)胞)效應(yīng)的體外方法，包括將所述T細(xì)胞與輻射模擬劑(如博萊霉素)接觸，但未公開或建議本文公開的持續(xù)時(shí)間。

Ozsahin等人(Clin Cancer Res，2005年10月15日；11(20)：7426-33)公開，輻射誘導(dǎo)的T-淋巴細(xì)胞凋亡可明顯地預(yù)測個(gè)體之間的晚期毒性差異，并可用于快速篩查對(duì)輻射治療超敏感的患者。

Weng等人(Mutat Res.，2008年3月29日；652(1)：46-53)通過體外測量誘導(dǎo)的和基礎(chǔ)的DNA損傷，表征了人白細(xì)胞的不同亞群暴露于H₂O₂(氧化劑)和博萊霉素(輻射模擬(radiomimetic)糖肽)后的不同敏感性。

Adema等人(Int J Radiat Biol.，2003年8月；79(8)：655-61)表明，在染色單體斷裂的G2分析中，博萊霉素和輻射具有相同的敏感性表型(這可以被認(rèn)為是對(duì)DNA損傷反應(yīng)的輻射敏感性易感基因的標(biāo)記)。然而，該試驗(yàn)不同于如上所述的RILA，細(xì)胞暴露于博萊霉素的持續(xù)時(shí)間也不同于本文所述的試驗(yàn)。

Tedeschi等人(Mutat Res.，2004年2月26日；546(1-2)：55-64)描述阿非迪霉素(APC)和博萊霉素(BLM)在體外處理培養(yǎng)的人淋巴細(xì)胞中進(jìn)行誘導(dǎo)后，在誘導(dǎo)染色體損傷的個(gè)體表達(dá)中某種遺傳學(xué)基礎(chǔ)。博萊霉素的暴露時(shí)間與本文公開的不同。

Azria等人(Cancer Radiother.，2008年11月12日(6-7)：619-24)公開最近CD4和CD8淋巴細(xì)胞凋亡低百分比與高度的后遺癥有關(guān)，并且患有嚴(yán)重輻射誘導(dǎo)晚期副作用的患者在候選基因(ATM、SOD2、TGFB1、XRCC1和XRCC3)上存在4個(gè)或更多SNP，并在體外低輻射-誘導(dǎo)CD8淋巴細(xì)胞凋亡。

所有這些文件都表明，在某些條件下，可以使用博萊霉素產(chǎn)生與某些輻射相同類型的DNA斷裂。然而，對(duì)于博萊霉素模擬RILA所用輻射條件的能力，以及是否可以產(chǎn)生能夠取代RILA的體外測試，這些文獻(xiàn)都沒有提及。