[發(fā)明專(zhuān)利]去細(xì)胞器官及其制備方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201980042536.0
• 申請(qǐng)日: 2019-09-11
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN112368369A
• 公開(kāi)（公告）日: 2021-02-12
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 謝達(dá)仁;魏肇怡;趙朝欽;郭哲成;賴(lài)意蘋(píng);史瑞尼
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 亞果生醫(yī)股份有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): C12N5/071
• 分類(lèi)號(hào): C12N5/071;C12N5/077;A61L27/36;A61F2/02;A61F2/04
• 代理公司: 北京華夏正合知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11017
• 代理人: 韓登營(yíng)

本發(fā)明是關(guān)于用以制備去細(xì)胞器官的方法。本發(fā)明方法包含對(duì)源自動(dòng)物的器官施以靜態(tài)超臨界流體(SCF)處理后，再施以動(dòng)態(tài)SCF處理。可選擇地，本發(fā)明的方法更包含在靜態(tài)SCF處理前施以高滲及低滲處理，以及/或是在動(dòng)態(tài)SCF處理后施以中和處理。本發(fā)明也提供以本發(fā)明方法制備的去細(xì)胞器官。

相關(guān)申請(qǐng)的交叉引用

本申請(qǐng)要求享有2018年9月11日所提交的美國(guó)臨時(shí)申請(qǐng)62/729,983的申請(qǐng)日的權(quán)益，該美國(guó)臨時(shí)申請(qǐng)?jiān)诖送ㄟ^(guò)引用而并入全文。

發(fā)明背景

1.技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明是關(guān)于用以制備去細(xì)胞器官的領(lǐng)域。更具體來(lái)說(shuō)，本發(fā)明是關(guān)于用以制備去細(xì)胞器官的改良方法，其中該去細(xì)胞器官適合作為異體移植物(xenograft)，以治療心臟病等不同疾病。

2.背景技術(shù)

心臟病泛指會(huì)影響心臟功能的各種疾病。常見(jiàn)的心臟病包含冠狀動(dòng)脈心臟病(coronary heart disease,CHD)、心臟瓣膜疾病(valvular heart disease)、心肌病(cardiomyopathy)、心律不齊(arrhythmias)及發(fā)炎性心臟病。世界衛(wèi)生組織(WorldHealth Organization,WHO)指出，每年有超過(guò)一千七百萬(wàn)人死于心血管疾病。與心臟病相關(guān)的典型病癥及癥狀包含，胸痛、呼吸困難、出汗、惡心、心跳不規(guī)律、虛弱及頭暈。造成心臟病的危險(xiǎn)因子包含吸煙、高血壓、高膽固醇、糖尿病、肥胖、酒精、不良飲食，以及缺乏身體活動(dòng)。

當(dāng)對(duì)其他醫(yī)藥或手術(shù)治療無(wú)效時(shí)，心臟移植提供了末期心臟衰竭或嚴(yán)重心臟病一種可行的外科移植手術(shù)。全球每年約有3,500例心臟移植手術(shù)，其中超過(guò)半數(shù)執(zhí)行于美國(guó)。除了感染及敗血癥之外，器官排斥也為心臟移植的主要并發(fā)癥之一。具體來(lái)說(shuō)，源自另一個(gè)體的移植心臟通常會(huì)于受體中誘發(fā)排斥反應(yīng)。為了抑制或減輕排斥反應(yīng)，病患終其一生需持續(xù)使用免疫抑制藥物。然而，免疫抑制藥物可能會(huì)產(chǎn)生許多副作用，例如增加感染及/或腫瘤發(fā)生的機(jī)率。

有鑒于此，相關(guān)領(lǐng)域亟需一種用以制備心臟的改良方法，其可保留心臟的天然結(jié)構(gòu)(structure)及構(gòu)造(conformation)，并降低免疫性物質(zhì)(immunogenic matter；例如，細(xì)胞及/或酶)的含量，使制備的心臟在移植后可作為支持宿主細(xì)胞生長(zhǎng)的三維骨架，而不會(huì)引發(fā)不良的排斥反應(yīng)。

發(fā)明內(nèi)容

發(fā)明內(nèi)容旨在提供本發(fā)明的簡(jiǎn)化摘要，以使閱讀者對(duì)本發(fā)明具備基本的理解。此發(fā)明內(nèi)容并非本發(fā)明的完整概述，且其用意并非在指出本發(fā)明實(shí)施例的重要/關(guān)鍵組件或界定本發(fā)明的范圍。其唯一目的旨在在此提供以簡(jiǎn)要形式公開(kāi)的一些關(guān)鍵概念，作為后面要介紹的更詳細(xì)內(nèi)容的前奏。

本發(fā)明的第一方面是關(guān)于一種用以制備去細(xì)胞器官(例如，去細(xì)胞心臟)的方法，其中該去細(xì)胞器官的特征在于保有天然的結(jié)構(gòu)及構(gòu)造，而不具免疫性殘留物(immunogenicity residue，例如細(xì)胞物質(zhì)(cellular matter))。由本發(fā)明方法制備的去細(xì)胞器官適用于進(jìn)行組織移植。用以制備去細(xì)胞器官的方法包含：

(a)以一第一超臨界流體(supercritical fluid,SCF)處理一器官，其中是在第一輔溶劑(co-solvent)存在下，于第一壓力200-500巴及第一溫度30-50℃下，處理第一時(shí)間10-100分鐘；以及

(b)以一連續(xù)式(continuous flow)的第二SCF處理步驟(a)的經(jīng)第一SCF處理的器官，其中是在第二輔溶劑存在下，于第二壓力200-500巴及第二溫度30-50℃下，處理第二時(shí)間10-100分鐘，其中該第二SCF的流速是每分鐘10-30升。

依據(jù)本發(fā)明實(shí)施方式，本發(fā)明方法不包含以一試劑處理該器官的步驟，其中該試劑是選自由一酶、一離子螫合劑、一清潔劑、一甘油及其組合所組成的群組。