[發(fā)明專利]去細(xì)胞器官及其制備方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201980042536.0
• 申請日: 2019-09-11
• 公開（公告）號: CN112368369A
• 公開（公告）日: 2021-02-12
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 謝達(dá)仁;魏肇怡;趙朝欽;郭哲成;賴意蘋;史瑞尼
• 申請（專利權(quán)）人: 亞果生醫(yī)股份有限公司
• 主分類號: C12N5/071
• 分類號: C12N5/071;C12N5/077;A61L27/36;A61F2/02;A61F2/04
• 代理公司: 北京華夏正合知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11017
• 代理人: 韓登營

1.一種用以制備一去細(xì)胞器官的方法，包含：

(a)以第一超臨界流體(supercritical fluid,SCF)處理一器官，其中是在第一輔溶劑存在下，于第一壓力200-500巴及第一溫度30-50℃下，處理第一時(shí)間10-100分鐘；以及

(b)以一連續(xù)式的第二SCF處理步驟(a)的經(jīng)第一SCF處理的器官，其中是在第二輔溶劑存在下，于第二壓力200-500巴及第二溫度30-50℃下，處理第二時(shí)間10-100分鐘，其中所述第二SCF的流速是每分鐘10-30升；

其中，所述方法不包含以一試劑處理所述器官的步驟，其中所述試劑是選自由酶、離子螫合劑、清潔劑、甘油及其組合所組成的群組。

2.如權(quán)利要求1所述的方法，其中所述第一及第二SCF是獨(dú)立選自由超臨界二氧化碳(supercritical carbon dioxide,ScCO₂)、超臨界氧化亞氮(supercritical nitrousoxide,ScN₂O)、超臨界烷類、超臨界烯類、超臨界醇類、超臨界丙酮及其組合所組成的群組。

3.如權(quán)利要求2所述的方法，其中所述第一及第二SCF是所述ScCO₂。

4.如權(quán)利要求3所述的方法，其中

所述第一及第二壓力各自是350巴；

所述第一及第二溫度各自是40℃；

所述第一及第二時(shí)間各自是10-80分鐘；以及

所述第二SCF的流速是每分鐘20升。

5.如權(quán)利要求4所述的方法，其中所述第一時(shí)間是30分鐘，且所述第二時(shí)間是60分鐘。

6.如權(quán)利要求4所述的方法，其中所述第一時(shí)間是10分鐘，且所述第二時(shí)間是80分鐘。

7.如權(quán)利要求4所述的方法，其中所述第一時(shí)間是80分鐘，且所述第二時(shí)間是10分鐘。

8.如權(quán)利要求1所述的方法，其中所述第一及第二輔溶劑各自是30-100％(體積％)乙醇。

9.如權(quán)利要求8所述的方法，其中所述第一及第二輔溶劑各自是75％(體積％)乙醇。

10.如權(quán)利要求1所述的方法，在步驟(a)之前還包含：

(1)以一高滲溶液浸泡所述器官10-60分鐘；以及

(2)以一低滲溶液浸泡步驟(1)的經(jīng)高滲溶液處理的器官10-60分鐘。

11.如權(quán)利要求10所述的方法，其中所述高滲溶液是一包含0.5-4.0M NaCl的鹽溶液，且所述低滲溶液是水。

12.如權(quán)利要求11所述的方法，其中

在步驟(1)中，以包含2.0M NaCl的鹽溶液浸泡所述器官30分鐘；以及

在步驟(2)中，以水浸泡經(jīng)所述鹽溶液處理的器官30分鐘。

13.如權(quán)利要求10所述的方法，其中至少重復(fù)步驟(1)及(2)二次。

14.如權(quán)利要求1所述的方法，在步驟(b)之后還包含：以一包含0.01-1.0N NaOH的溶液處理經(jīng)所述第二SCF處理的器官。

15.如權(quán)利要求14所述的方法，其中所述溶液包含0.1N NaOH。

16.如權(quán)利要求1所述的方法，其中所述器官是心臟、小腸、肺臟、脾臟、腎臟、肝臟、胃、胰臟、膀胱、結(jié)腸、直腸或腦。

17.如權(quán)利要求16所述的方法，其中所述器官是心臟。