[發明專利]腺相關病毒的肝臟特異性嗜性

在審

• 申請號: 201980042499.3
• 申請日: 2019-05-10
• 公開（公告）號: CN112368391A
• 公開（公告）日: 2021-02-12
• 發明（設計）人: L.H.范登伯格;P.施密特;C.蒂珀;C.昂祖;E.津恩
• 申請（專利權）人: 馬薩諸塞眼科耳科診所;司科彭斯眼部研究學會
• 主分類號: C12N15/864
• 分類號: C12N15/864;C12N7/00;C12R1/93
• 代理公司: 北京市柳沈律師事務所 11105
• 代理人: 易方方

本公開內容提供了用于改變或變化腺相關病毒(AAV)的組織嗜性(例如，肝臟嗜性)的組合物和方法。

相關申請的交叉引用

本申請要求2019年04月30日提交的美國臨時申請序列號62/841,179和2018年05月11日提交的美國臨時申請序列號62/670,543的優先權。

發明領域

本公開內容總體上涉及腺相關病毒(AAV)改變的組織嗜性，并且具體地涉及控制AAV的肝臟嗜性。

背景技術

腺相關病毒(AAV)是屬于細小病毒屬的細小病毒，而細小病毒屬又屬于細小病毒科。該病毒是一種復制缺陷型、無包膜病毒，可感染人類和某些靈長類動物，但已知不會引起疾病。AAV能夠感染分裂細胞和靜止細胞，并以染色體外狀態持續存在，而不會整合到宿主細胞的基因組中，盡管在天然病毒中，病毒攜帶的基因也可能會整合到宿主基因組中。這些特征使得AAV成為用作基因療法中的病毒載體的候選物。然而，某些AAV血清型會表現出肝臟嗜性，這可能取決于所治療的疾病，其可能是需要的或不需要的。

了解如何確定AAV的肝臟嗜性，并且基于該信息能夠操縱AAV的嗜性，將是有益的。

發明內容

AAV的組織特異性(即，組織嗜性)由衣殼血清型決定，并且本文所述的方法和組合物能夠改變特定AAV的組織嗜性，以改善由這些改變的AAV遞送的療法的特異性。例如，改變或變化AAV的肝臟嗜性可能是有益的，例如，當肝臟是所需靶點時，例如通過增強天然肝臟嗜性，還有當肝臟不是所需靶點時，例如通過降低天然肝臟嗜性。例如，當該病毒被更有效地遞送至肝臟(或非肝器官)中的細胞并更有效地對其進行轉染時，可以向該對象施用較低劑量的給定AAV。

在一個方面中，本公開內容提供了改變腺相關病毒(AAV)載體的組織嗜性的方法。這種方法通常包括定位AAV衣殼蛋白內對應于在Anc80(SEQ ID NO:1)的衣殼蛋白中的位置266的氨基酸位置；并且將在定位的位置的天然存在的氨基酸替代為甘氨酸(G)氨基酸殘基，以便為所得AAV載體提供增強的肝臟嗜性，或者替代為丙氨酸(A)氨基酸殘基，以降低肝臟嗜性，即為所述所得AAV提供肝臟脫靶。

在一些實施方式中，這種方法包括將在定位的位置的天然存在的氨基酸替代為G氨基酸殘基，以便為所述所得AAV載體提供增強的肝臟嗜性(例如，肝臟富集)。在一些實施方式中，這種方法包括將在定位的位置的天然存在的氨基酸替代為A氨基酸殘基，以提供降低的肝臟嗜性，例如通過所述所得AAV使所述肝臟脫靶。

在另一個方面中，本公開內容提供了改變腺相關病毒(AAV)載體的組織嗜性的方法。這種方法通常包括定位AAV衣殼蛋白內對應于在Anc80(SEQ ID NO:1)的衣殼蛋白中的位置168的氨基酸位置；并且將在定位的位置的天然存在的氨基酸替代為精氨酸(R)氨基酸殘基，以便為所得AAV載體提供增強的肝臟嗜性，或者替代為賴氨酸(K)氨基酸殘基，以提供降低的肝臟嗜性，例如，所述所得AAV肝臟脫靶。

這種方法通常包括定位AAV衣殼蛋白內對應于在Anc80(SEQ ID NO:1)的衣殼蛋白中的位置168的氨基酸位置；并且將在定位的位置的天然存在的氨基酸替代為精氨酸(R)氨基酸殘基，以便為所得AAV載體提供增強的肝臟嗜性(例如，肝臟富集)，或者替代為賴氨酸(K)氨基酸殘基，以提供降低的肝臟嗜性，例如，所述所得AAV肝臟脫靶。

在一些實施方式中，這種方法包括將在定位的位置的天然存在的氨基酸替代為R氨基酸殘基，以便為所述所得AAV載體提供肝臟富集。在一些實施方式中，這種方法可以包括將在定位的位置的天然存在的氨基酸替代為K氨基酸殘基，以提供所述所得AAV降低的肝臟靶向。