[發明專利]產生誘導式少突膠質譜系細胞的方法及使用所述細胞的治療

在審

• 申請號: 201980039972.2
• 申請日: 2019-06-14
• 公開（公告）號: CN112513257A
• 公開（公告）日: 2021-03-16
• 發明（設計）人: 呂仁;黃筱鈞;賴培倫;吳志昊
• 申請（專利權）人: 中央研究院
• 主分類號: C12N5/079
• 分類號: C12N5/079;C12N5/0793;G01N33/50
• 代理公司: 北京戈程知識產權代理有限公司 11314
• 代理人: 程偉

1.一種產生誘導式少突膠質譜系細胞(induced oligodendrocyte-lineage cells,OLGs)的方法，包括在允許部分皮膚細胞重新編程為誘導式少突膠質譜系細胞(OLGs)的條件下培養所述皮膚細胞，其中該條件包括培養基，該培養基包含化學誘導劑，該化學誘導劑包括Rho相關蛋白激酶(Rho-associated protein kinase,ROCK)抑制劑，其中所述皮膚細胞以選自由下列所組成的群組的輔助劑處理：組蛋白去乙?；?histone deacetylase,HDAC)抑制劑、細胞周期蛋白依賴性激酶(cyclin-dependent kinase,CDK)抑制劑、蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)抑制劑、環腺苷單磷酸(cyclic adenosine monophosphate,cAMP)活化劑，以及其任何組合。

2.如權利要求1所述的方法，其中該皮膚細胞為纖維母細胞。

3.如權利要求1所述的方法，其中該輔助劑包括CDK抑制劑。

4.如權利要求1所述的方法，其中該輔助劑包括HDAC抑制劑以及cAMP活化劑，可視需要地連同CDK抑制劑。

5.如權利要求1所述的方法，其中該輔助劑以及該化學誘導劑同時或依次添加至該培養基中。

6.如權利要求1所述的方法，其中該輔助劑在該化學誘導劑之前被添加至該培養基中。

7.如權利要求1所述的方法，其中該化學誘導劑為小分子。

8.如權利要求1所述的方法，其中該輔助劑為小分子。

9.如權利要求1所述的方法，其中該化學誘導劑包括Y27632。

10.如權利要求1所述的方法，其中該HDAC抑制劑是選自由下列所組成的群組：VPA、莫汀司他(Mocetinostat)、帕新司他(Pracinostat)及其任何組合；該環腺苷單磷酸(cAMP)活化劑包括毛喉素(forskolin,FSK)；該CDK抑制劑包括SU9516；及/或該PKC抑制劑包括G06983。

11.如權利要求4所述的方法，其中該HDAC抑制劑在該ROCK抑制劑之前被加入該培養基中。

12.如權利要求1所述的方法，其中所述皮膚細胞為人類細胞。

13.如權利要求1所述的方法，其中該誘導式少突膠質譜系細胞(OLGs)表現選自由下列所組成的群組的細胞標記：血小板衍生的生長因子受體(platelet-derived growthfactor receptor,PDGFR)、髓鞘堿性蛋白(myelin basic protein,MBP)、少突膠質細胞轉錄因子(oligodendrocyte transcription factor,OLIG2)、SOX10、蛋白脂質蛋白(proteolipid protein,PLP)1、Ki67、A2B5、O4，以及其任何組合。

14.如權利要求1所述的方法，進一步包括從該細胞培養物中分離該誘導式OLGs以獲得分離的誘導式OLGs群。

15.一種治療疾病或病癥的方法，包括給予有需要這種治療的受試者治療有效量的誘導式OLGs，其中該誘導式OLGs通過以包括Rho相關蛋白激酶(ROCK)抑制劑的化學誘導劑處理而衍生自皮膚細胞，其中所述皮膚細胞以選自由下列所組成的群組的輔助劑處理：組蛋白去乙?；?HDAC)抑制劑、細胞周期蛋白依賴性激酶(CDK)抑制劑、蛋白激酶C(PKC)抑制劑、環腺苷單磷酸(cAMP)活化劑，以及其任何組合。