[發明專利]早期檢測禽種群中壞死性腸炎爆發的方法

在審

• 申請號: 201980038273.6
• 申請日: 2019-06-07
• 公開（公告）號: CN112236533A
• 公開（公告）日: 2021-01-15
• 發明（設計）人: E·I·伊格威;F·波爾;A·卡佩爾;F·斯爾曼;M·威絲曼;D·L·維柯爾;K·馬丁;C·米都布魯克斯;S·提歷;J·史密斯
• 申請（專利權）人: 贏創運營有限公司
• 主分類號: C12Q1/6883
• 分類號: C12Q1/6883;C12Q1/689
• 代理公司: 中國貿促會專利商標事務所有限公司 11038
• 代理人: 張小勇

本發明涉及早期檢測禽種群中壞死性腸炎爆發的體外方法，該方法包括：a)在連續的時間點收集源自禽種群的糞便樣本材料；和b)確定步驟a)中獲得的樣本材料中所包含的標志物基因netB與cpa的量的比；其中netB與cpa的量的比隨時間的逆轉是壞死性腸炎爆發的早期指示。

技術領域

本發明涉及早期檢測禽種群中壞死性腸炎爆發的體外方法。更具體地，本發明提供了隨時間監測糞便樣本材料中兩種毒素編碼基因的量的比(分別為netB/cpa和cpa/netB)的方法，其能夠早期指示壞死性腸炎的爆發。

背景技術

產氣莢膜梭菌(Clostridium perfringens)是一種普遍存在的病原體，它使用大量毒素在動物以及人類中引起組織毒性和腸道感染。產氣莢膜梭菌(C.perfringens)是革蘭氏陽性、桿狀、形成孢子、耐氧的厭氧菌。并非所有產氣莢膜梭菌菌株都具有毒性。根據四種可疑主要毒素(α、β、ε和ι)的產生，有毒的產氣莢膜梭菌菌株傳統上可分為五種毒素類型(A、B、C、D和E)。根據產生的毒素(主要和其他毒素，如NetB、Cpb2等)，可以在不同的宿主生物中誘導產氣莢膜梭菌亞種特定的綜合征/疾病[Rood，JI(1998)Virulence genes ofClostridium perfringens；Annual Review of Microbiology 52:333-360]。毒素由位于染色體和/或毒素質粒上的多核苷酸序列編碼[Popoff，M.R.和P.Bouvet(2013),Geneticcharacteristics of toxigenic Clostridia and toxin gene evolutionToxicon 75:63-89]。

作為一種動物病原體，產氣莢膜梭菌是包括禽壞死性腸炎的多種嚴重疾病的緣由，每年從全球農業系統中消耗掉約60億美元[Wade，B.，Keyburn，AL(2015)，The truecost of necrotic enteritisWorld Poultry 31,16–17]。

壞死性腸炎(NE)是一種最早于1961年被描述的家禽腸道疾病。雞的NE表現為急性或慢性腸毒血癥。急性疾病由于腸壁壞死性病變的發展而導致顯著水平的死亡率，而慢性疾病導致生產力和福利的重大損失。早期關于NE的研究表明，與該疾病有關的主要毒力因子是α毒素(稱為Cpa或Plc)，其具有磷脂酶C和鞘磷脂酶活性[Keyburn，A.L.等人(2006)Alpha-toxin of Clostridium perfringens is not an essential virulence factorin necrotic enteritis in chickens,Infection and Immunity 74(11):6496-6500]。所有產氣莢膜梭菌菌株均攜帶編碼α毒素的基因[Rood，J.I.(1998)Virulence genes ofClostridium perfringens,Annual Review of Microbiology 52:333-360；Titball,R.W.等人(1999)The Clostridium perfringensα-toxin.Anaerobe 5(2):51-64]。然而，最近的研究表明，α毒素似乎不是必需的毒力因子，因為α毒素突變株能夠引起NE，這使得α毒素在疾病中的作用受到懷疑。在更近的研究中，新的成孔毒素NetB被提出在這種疾病的發展中起著重要的作用[Keyburn，A.L.等人(2008)NetB,a new toxin that isassociated with avian necrotic enteritis caused by Clostridium perfringensPLoS Pathogens 4(2)]。