[發明專利]聚底物及其使用方法

在審

• 申請號: 201980031180.0
• 申請日: 2019-05-10
• 公開（公告）號: CN112105749A
• 公開（公告）日: 2020-12-18
• 發明（設計）人: 拉多吉·德爾馬納茨;陳艷;李漢東;斯尼澤納·德爾馬納茨;蒂莫西·朱
• 申請（專利權）人: 深圳華大智造科技有限公司
• 主分類號: C12Q1/6869
• 分類號: C12Q1/6869;C12N11/18
• 代理公司: 上海勝康律師事務所 31263
• 代理人: 樊英如;張華

1.一種包含聚底物的組合物，其中所述聚底物包含：

(i)聚合物分子，

(ii)附著于所述聚合物分子的多個底物分子，和

(iii)附著于所述聚合物分子的結合部分，

其中所述底物分子是發光酶底物；并且

其中所述結合部分特異性結合至：

(a)引物延伸產物的3'末端核苷酸，或

(b)第二結合部分，并且所述第二結合部分與引物延伸產物的3'末端核苷酸特異性結合。

2.根據權利要求1所述的組合物，其中所述聚合物分子是多糖聚合物。

3.根據權利要求2所述的組合物，其中所述多糖聚合物包括葡萄糖、甘露糖、半乳糖、果糖或其組合。

4.根據權利要求2或3所述的組合物，其中所述多糖聚合物是直鏈或支鏈的。

5.根據權利要求2至4中任一項所述的組合物，其中所述多糖聚合物包含5-10000個單體。

6.根據權利要求2至5中任一項所述的組合物，其中所述多糖聚合物是均聚物。

7.根據權利要求2至6中任一項所述的組合物，其中所述多糖聚合物是β-葡聚糖或α-葡聚糖。

8.根據權利要求7所述的組合物，其中所述多糖聚合物選自由右旋糖苷、淀粉、糖原、支鏈淀粉、纖維素、熱凝多糖、海帶多糖、地衣聚糖和酵母聚糖組成的群組。

9.根據權利要求2所述的組合物，其中所述多糖聚合物是右旋糖苷。

10.根據權利要求1至9中任一項所述的組合物，其中所述底物分子與所述聚合物分子共價結合。

11.根據權利要求1至10中任一項所述的組合物，其中所述多個底物分子選自吖啶酯、螢光素、魯米諾、腔腸素、異魯米諾、2,2'-疊氮基雙[3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸]-二銨鹽(ABTS)、鄰苯二胺二鹽酸鹽(OPD)、3,3',5,5'-四甲基聯苯胺(TMB)、鄰硝基苯基-β-D-吡喃半乳糖苷(ONPG)、其衍生物或其組合。

12.根據權利要求1至11中任一項所述的組合物，其中，所述聚底物包含單一種類的所述底物分子。

13.根據權利要求1至12中任一項所述的組合物，其中所述底物分子是熒光素、魯米諾、異魯米諾或腔腸素。

14.根據權利要求1至13中任一項所述的組合物，其中，所述聚底物包含五(5)個或更多個底物分子，并且所述五個或更多個底物分子可以是單一種類或不止一個種類。

15.根據權利要求1至14中任一項所述的組合物，其中所述結合部分是識別所述引物延伸產物的3'末端核苷酸中的所述堿基、所述糖、可裂解的保護基團或這些組分的組合的親和試劑。

16.根據權利要求15所述的組合物，其中所述親和試劑是抗體、確定劑、適體或結蛋白。

17.根據權利要求1至16中任一項所述的組合物，其中所述結合部分結合dNTP類似物的親和標記配體。

18.根據權利要求17所述的組合物，其中所述dNTP類似物包含將所述親和標記配體連接至核堿基的可裂解的接頭。

19.根據權利要求17的組合物，其中所述親和標記配體是生物素、親和素、鏈霉親和素或抗原。

20.根據權利要求17的組合物，其中所述結合部分是生物素、抗生物素蛋白、鏈霉親和素或抗原或抗體。