[發明專利]產生T細胞譜系細胞的方法

在審

• 申請號: 201980025370.1
• 申請日: 2019-02-14
• 公開（公告）號: CN112041431A
• 公開（公告）日: 2020-12-04
• 發明（設計）人: J·C·阻尼加-普魯科爾;M·莫塔希亞米;A·特羅特曼-格蘭特
• 申請（專利權）人: 桑尼布魯克研究所
• 主分類號: C12N5/0783
• 分類號: C12N5/0783;A61K35/17;C07K14/705;C07K17/00;C12N5/071;C12N5/0735;C12N5/0789
• 代理公司: 北京彩和律師事務所 11688
• 代理人: 張紅春

1.產生T細胞譜系細胞的方法，其包括：(a)培養包含干細胞或祖細胞的樣本，其中所述干細胞或祖細胞具有綴合至懸浮支持物的Notch配體；以及(b)分離T細胞譜系細胞。

2.根據權利要求1所述的方法，其中所述懸浮支持物是顆粒。

3.根據權利要求1或2所述的方法，其中所述懸浮支持物是微珠。

4.根據權利要求1-3中任一項所述的方法，其中所述具有Notch配體的干細胞或祖細胞為懸浮培養。

5.根據權利要求1-4中任一項所述的方法，其中所述干細胞選自：造血干/祖細胞(HSPC)、胚胎干細胞或誘導性多能干細胞(iPSC)。

6.根據權利要求1-5中任一項所述的方法，其中所述干細胞是CD34⁺或CD34⁺CD38^-/^loHSPC。

7.根據權利要求1-4中任一項所述的方法，其中所述干細胞是CD34⁺造血前體細胞，任選地為從iPSC分化而來的CD34⁺造血前體細胞。

8.根據權利要求1-7中任一項所述的方法，其中所述Notch配體是DL4。

9.根據權利要求1-8中任一項所述的方法，其中所述T細胞譜系細胞是T細胞祖細胞(proT)。

10.根據權利要求9所述的方法，其中所述干細胞或祖細胞是人類細胞，并且所述proT細胞具有CD34⁺CD7⁺或CD7⁺CD5⁺CD1a^-表型。

11.根據權利要求10所述的方法，其中所述干細胞或祖細胞是小鼠細胞，任選地為譜系-CD117⁺Sca-1⁺小鼠細胞，并且所述proT細胞具有CD25⁺或CD25⁺CD90⁺表型。

12.根據權利要求1-8中任一項所述的方法，其中所述T細胞譜系細胞是CD4⁺CD8⁺雙陽性細胞、CD4⁺CD8⁺CD3⁺雙陽性細胞、CD8⁺CD3⁺單陽性細胞或CD4⁺CD3⁺單陽性細胞。

13.根據權利要求1-12中任一項所述的方法，其中所述干細胞或祖細胞培養于無基質細胞的培養基。

14.根據權利要求1-13中任一項所述的方法，其中所述干細胞或祖細胞與至少一種T細胞共刺激分子一起培養，所述T細胞共刺激分子結合至懸浮支持物，任選地其中所述至少一種T細胞共刺激分子是VCAM1。

15.T細胞譜系細胞，其中所述細胞通過權利要求1-14中任一項所述的方法產生。

16.根據權利要求15所述的細胞，其中所述細胞是T細胞祖細胞、CD4⁺CD8⁺雙陽性細胞、CD4⁺CD8⁺CD3⁺雙陽性細胞、CD8⁺CD3⁺單陽性細胞或CD4⁺CD3⁺單陽性細胞。