[發明專利]微芯片毛細管電泳測定法及試劑

在審

• 申請號: 201980020003.2
• 申請日: 2019-03-15
• 公開（公告）號: CN111868085A
• 公開（公告）日: 2020-10-30
• 發明（設計）人: T·里爾曼;G·卡羅;J·施奈德海因策;N·M·納爾
• 申請（專利權）人: 瑞澤恩制藥公司
• 主分類號: C07K16/22
• 分類號: C07K16/22;C07K16/24;G01N33/68
• 代理公司: 北京市君合律師事務所 11517
• 代理人: 何箏;顧云峰

1.一種水性電泳樣品緩沖液，其包含：

155mM至175mM 2-碘乙酰胺；

0.50％至1.5％十二烷基硫酸鋰；和

75mM至95mM磷酸鈉，

其中所述水性電泳樣品緩沖液具有小于7的pH。

2.根據權利要求1所述的水性緩沖液，其中所述pH為6。

3.根據權利要求1或2所述的水性緩沖液，其包含166mM 2-碘乙酰胺、0.81％十二烷基硫酸鋰和81mM磷酸鈉。

4.一種水性電泳樣品緩沖液，其由以下組成：

166mM 2-碘乙酰胺，

0.81％十二烷基硫酸鋰，和

81mM磷酸鈉，

其中所述水性電泳樣品緩沖液具有6.0的pH。

5.一種水性電泳樣品緩沖液，其包含：

0.50％至1.5％十二烷基硫酸鋰；

45mM至75mM磷酸鈉，和

還原劑，

其中所述水性電泳樣品緩沖液具有大于8的pH。

6.根據權利要求5所述的水性緩沖液，其中所述pH為9。

7.根據權利要求5或6所述的水性緩沖液，其包含135mM至155mM二硫蘇糖醇。

8.根據權利要求5至7中任一項所述的水性緩沖液，其包含0.69％十二烷基硫酸鋰、69mM磷酸鈉和142mM二硫蘇糖醇。

9.一種水性電泳樣品緩沖液，其由以下組成：

0.69％十二烷基硫酸鋰；

69mM磷酸鈉，和

142mM二硫蘇糖醇，

其中所述水性電泳樣品緩沖液具有9.0的pH。

10.一種鑒定蛋白質藥物樣品中的污染物或雜質的方法，所述方法包括以下步驟：

將所述蛋白藥物樣品添加至根據權利要求1-4中任一項所述的緩沖液中以形成緩沖蛋白藥物樣品；

將所述緩沖蛋白藥物樣品加熱至65℃至85℃持續5至15分鐘以形成變性的緩沖蛋白藥物樣品；

將可檢測標記添加至所述變性的緩沖蛋白藥物樣品并在30℃至40℃下將其加熱20至40分鐘以形成變性的經標記蛋白藥物樣品；

稀釋所述變性的經標記蛋白藥物樣品并使其在微芯片毛細管電泳系統上接受MCE以分離所述稀釋的蛋白質藥物樣品，從而產生電泳圖；以及

鑒定所述電泳圖中與污染物或雜質相對應的峰。

11.根據權利要求10所述的方法，其中將所述緩沖蛋白藥物樣品在70℃下加熱10分鐘。

12.根據權利要求10或11所述的方法，其中將所述經標記蛋白質藥物樣品在35℃下加熱30分鐘。

13.根據權利要求10至12中任一項所述的方法，其中所述稀釋的蛋白質藥物樣品為9μg/ml。

14.一種鑒定蛋白質藥物樣品中的污染物或雜質的方法，所述方法包括以下步驟：

將蛋白樣品添加至根據權利要求5-9中任一項所述的緩沖液中以形成緩沖蛋白藥物樣品；

將所述緩沖蛋白質藥物樣品加熱至65℃至85℃持續5至15分鐘以形成變性的蛋白質藥物樣品；

將可檢測標記添加至所述變性的蛋白藥物樣品并在30℃至40℃下將其加熱20至40分鐘以形成變性的經標記蛋白藥物樣品；

稀釋所述變性的經標記蛋白藥物樣品并使其在微芯片毛細管電泳系統上接受MCE分析以產生電泳圖；以及

鑒定所述電泳圖中與污染物或雜質相對應的峰。

15.根據權利要求14所述的方法，其中將所述緩沖蛋白藥物樣品在70℃下加熱10分鐘。