[發(fā)明專利]因子H增強(qiáng)抗體及其用途

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201980019128.3
• 申請日: 2019-01-15
• 公開（公告）號: CN111868083A
• 公開（公告）日: 2020-10-30
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 塔卡·威廉·庫依普斯;黛安娜·武泰;瑪利亞·克萊爾·布勞威爾;理查德·本杰明·普維
• 申請（專利權(quán)）人: 桑昆血液供給基金會
• 主分類號: C07K16/18
• 分類號: C07K16/18
• 代理公司: 北京康信知識產(chǎn)權(quán)代理有限責(zé)任公司 11240
• 代理人: 曲在丹

本發(fā)明涉及對因子H特異的新型分離的、合成的或重組的抗體及其片段。本發(fā)明還涉及此類抗體和片段用于抑制補(bǔ)體激活和治療補(bǔ)體激活相關(guān)性病癥的用途。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及免疫學(xué)和醫(yī)學(xué)領(lǐng)域。特別地，本發(fā)明涉及因子H特異性抗體及其用途。

背景技術(shù)

補(bǔ)體系統(tǒng)是先天免疫的重要元素，有助于保護(hù)許多生物體(例如哺乳動(dòng)物)免受入侵病原體的侵襲。補(bǔ)體系統(tǒng)由30多種主要在肝臟中合成的不同組分組成。補(bǔ)體系統(tǒng)的激活通過三種不同途徑發(fā)生：經(jīng)典途徑，凝集素途徑和替代途徑。這三種途徑在C3轉(zhuǎn)化酶形成時(shí)會聚，每種途徑的C3轉(zhuǎn)化酶均不同，但活性相似。

在經(jīng)典補(bǔ)體途徑中，由C1q、C1r和C1s組成的補(bǔ)體成分(C)1復(fù)合物的激活在結(jié)合抗體-抗原復(fù)合物時(shí)發(fā)生。C1復(fù)合物切割C4和C2，導(dǎo)致形成由C4bC2a組成的C3轉(zhuǎn)化酶。C3轉(zhuǎn)化酶將C3切割成活性組分C3a和C3b。在凝集素途徑中，結(jié)合甘露糖的凝集素與致病性表面上的甘露糖殘基結(jié)合，從而激活能夠切割C4和C2的絲氨酸蛋白酶MASP-1和MASP-2。與經(jīng)典途徑一樣，這導(dǎo)致C4bC2a C3轉(zhuǎn)化酶的形成。該C3轉(zhuǎn)化酶可以結(jié)合C3b形成C5轉(zhuǎn)化酶。與經(jīng)典和凝集素途徑相反，所述替代途徑由于血漿中C3自發(fā)水解為C3(H₂O)而具有較低水平的連續(xù)活性。這種C3b-樣C3(H₂O)可以通過結(jié)合因子B(FB)形成液相C3轉(zhuǎn)化酶，而結(jié)合因子B(FB)又會被因子D激活為Bb。同樣，當(dāng)C3b結(jié)合到表面時(shí)，它可能會結(jié)合FB形成C3bB。該復(fù)合物被因子D切割為C3bBb，C3bBb是替代途徑的C3轉(zhuǎn)化酶，可通過備解素(因子P)穩(wěn)定為C3bBbP。該C3轉(zhuǎn)化酶能夠?qū)3切割成C3a和C3b。除此過程外，替代途徑還充當(dāng)經(jīng)典途徑和凝集素激活途徑的擴(kuò)增環(huán)，因?yàn)樵谶@些途徑中生成的C3b可充當(dāng)替代途徑的起點(diǎn)。因此，擴(kuò)增環(huán)導(dǎo)致經(jīng)典和凝集素途徑的增強(qiáng)。在三種激活途徑之一中形成的C3轉(zhuǎn)化酶可以結(jié)合C3b以形成C5轉(zhuǎn)化酶。所有三種補(bǔ)體途徑的C5轉(zhuǎn)化酶均將C5激活為C5a和C5b，從而啟動(dòng)補(bǔ)體系統(tǒng)的終末途徑。C5b結(jié)合C6、C7、C8和C9以形成膜攻擊復(fù)合物(MAC)，后者形成跨膜通道并引起細(xì)胞裂解。

緊接著在病原體的膜上形成孔之后，補(bǔ)體通過與C3b分子進(jìn)行調(diào)理作用和產(chǎn)生吸引并激活免疫細(xì)胞到感染部位的促炎性肽(如C3a和C5a)，從而幫助清除病原體或改變的自身細(xì)胞。由于補(bǔ)體具有很強(qiáng)的促炎特性，因此宿主細(xì)胞受到多種膜和可溶性補(bǔ)體調(diào)節(jié)蛋白的良好保護(hù)。

替代途徑占總補(bǔ)體活性的80-90％。因此，調(diào)節(jié)此途徑至關(guān)重要。由C3的自發(fā)水解形成的C3(H₂O)及C3b(如果未與病原體結(jié)合)通常被因子H(FH)、因子I(FI)和宿主細(xì)胞表面分子快速滅活，從而抑制C3轉(zhuǎn)化酶的形成。CD55(也稱為衰變加速因子或DAF)在宿主細(xì)胞表面結(jié)合C3b。FI將C3b切割為非活性形式，但取決于在細(xì)胞表面表達(dá)的輔助因子(CD46、MCP)或在血漿中循環(huán)的輔助因子(FH)。FH是血漿糖蛋白，對于控制溶液和細(xì)胞表面的補(bǔ)體替代途徑至關(guān)重要。FH在與FB相同的位置結(jié)合C3b，從而防止C3轉(zhuǎn)化酶的形成。FH還具有衰變加速活性，即一旦形成，其即促進(jìn)替代途徑C3轉(zhuǎn)化酶的解離。FH是否與C3b結(jié)合取決于細(xì)胞表面上存在的碳水化合物。存在于宿主細(xì)胞表面的唾液酸、糖胺聚糖和肝素促進(jìn)FH與C3b的結(jié)合，而C3b與病原體表面表達(dá)的分子的結(jié)合導(dǎo)致FB的結(jié)合。因此，F(xiàn)H在宿主細(xì)胞而不是在病原細(xì)胞的表面上發(fā)揮補(bǔ)體抑制活性，因?yàn)榕cFH結(jié)合的細(xì)胞表面分子在宿主細(xì)胞上表達(dá)，但通常不在病原細(xì)胞上表達(dá)。FH包含20個(gè)補(bǔ)體控制蛋白(CCP)結(jié)構(gòu)域，從FH的N端開始編號為1-20。CCP結(jié)構(gòu)域也稱為短共有重復(fù)(SCR)或sushi結(jié)構(gòu)域。CCP 1-4是參與調(diào)控的結(jié)構(gòu)域，CCP 19-20參與結(jié)合C3b，且CCP 6、7、8、19和20與在細(xì)胞表面表達(dá)的GAG和唾液酸結(jié)合。結(jié)合CCP19和/或CCP20的抗體抑制FH的活性。