[發明專利]用于表征藥物產品雜質的系統和方法

在審

• 申請號: 201980007256.6
• 申請日: 2019-01-28
• 公開（公告）號: CN111655722A
• 公開（公告）日: 2020-09-11
• 發明（設計）人: 王順海
• 申請（專利權）人: 瑞澤恩制藥公司
• 主分類號: C07K16/00
• 分類號: C07K16/00
• 代理公司: 北京市君合律師事務所 11517
• 代理人: 黃遵玲;顧云峰

1.一種蛋白藥物產品，其包含：

蛋白藥物和賦形劑，其中所述蛋白藥物產品包含0.05％至30.0％(w/w)的中間高分子量蛋白藥物雜質。

2.根據權利要求1所述的蛋白藥物產品，其中所述蛋白藥物產品選自抗體、融合蛋白、重組蛋白或它們的組合。

3.根據權利要求1或2所述的蛋白藥物產品，其中所述中間分子量蛋白藥物雜質選自具有額外輕鏈的單體，包括H2L3和H2L4物質；單體+Fab片段復合物；和它們的組合。

4.根據權利要求1-3中任一項所述的蛋白藥物產品，其中所述藥物產品包含0.05％至25％w/w的中間高分子量蛋白藥物雜質。

5.根據權利要求1-3中任一項所述的蛋白藥物產品，其中所述藥物產品包含0.05％至15％w/w的中間高分子量蛋白藥物雜質。

6.根據權利要求1-3中任一項所述的蛋白藥物產品，其中所述藥物產品包含0.05％至10％w/w的中間高分子量蛋白藥物雜質。

7.根據權利要求1-3中任一項所述的蛋白藥物產品，其中所述藥物產品包含0.05％至5％w/w的中間高分子量蛋白藥物雜質。

8.一種用于表征中間高分子量蛋白藥物產品雜質的方法，其包括：

將蛋白藥物產品樣品去糖基化；

使用水性流動相通過天然尺寸排阻色譜法分離蛋白藥物產品樣品的蛋白組分；

通過質譜法分析分離的蛋白組分以表征蛋白藥物產品樣品中的中間高分子量蛋白藥物產品雜質。

9.根據權利要求8所述的方法，其中所述蛋白藥物產品樣品來自補料分批培養物。

10.根據權利要求8或9所述的方法，其中所述蛋白藥物產品選自抗體、融合蛋白、重組蛋白或它們的組合。

11.根據權利要求8-10中任一項所述的方法，其中所述中間高分子量蛋白藥物產品雜質被表征為選自以下的中間高分子量蛋白藥物產品雜質：具有額外輕鏈的單體，包括H2L3和H2L4物質；單體+Fab片段復合物；和它們的組合。

12.一種生產抗體的方法，其包括：

在細胞培養物中培養產生所述抗體的細胞；

從所述細胞培養物得到樣品；

根據權利要求8-11中任一項所述的方法表征和定量所述樣品中的中間高分子量雜質，以及

改變細胞培養物的一種或多種培養條件以減少在所述抗體的細胞培養過程中產生的所表征的低分子蛋白藥物雜質的量。

13.根據權利要求12所述的方法，其中為了減少中間高分子量蛋白藥物雜質的量而改變的細胞培養物的一種或多種條件選自pH、細胞密度、氨基酸濃度、滲透壓、生長因子濃度、攪拌、氣體分壓、表面活性劑或它們的組合。

14.根據權利要求12或13所述的方法，其中所述細胞選自細菌細胞；酵母細胞；中國倉鼠卵巢(CHO)細胞(例如CHO K1、DXB-11CHO、Veggie-CHO)；COS細胞(例如COS-7)；視網膜細胞；Vero細胞；CV1細胞；腎細胞(例如HEK293、293EBNA、MSR 293、MDCK、HaK、BHK21)；HeLa細胞；HepG2細胞；WI38細胞；MRC 5細胞；Colo25細胞；HB 8065細胞；HL-60細胞；淋巴細胞細胞，例如自體T細胞；Jurkat(T淋巴細胞)或Daudi(B淋巴細胞)；A431(表皮)細胞；U937細胞；3T3細胞；L細胞；C127細胞；SP2/0細胞；NS-0細胞；MMT細胞；干細胞、腫瘤細胞和從前述細胞中的任一種衍生出的細胞系。

15.根據權利要求12或13所述的方法，其中所述細胞是雜交瘤細胞或四源雜交瘤細胞。