[發明專利]一種抗CK18單克隆抗體及其應用在審
| 申請號： | 201911424604.8 | 申請日： | 2019-12-31 |
| 公開（公告）號： | CN111269314A | 公開（公告）日： | 2020-06-12 |
| 發明（設計）人： | 陳菲;王瑩 | 申請（專利權）人： | 蘇州和銳生物科技有限公司 |
| 主分類號： | C07K16/18 | 分類號： | C07K16/18;G01N33/68;G01N33/577 |
| 代理公司： | 蘇州華博知識產權代理有限公司 32232 | 代理人： | 何蔚 |
| 地址： | 215000 江蘇省蘇州市工業園區星湖*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 ck18 單克隆抗體 及其 應用 | ||
1.一種抗CK18單克隆抗體，其特征在于，所述抗CK18單克隆抗體包含重鏈可變區的VHCDR1-3和輕鏈可變區的VLCDR1-3；
VHCDR1：GGATACACATTCACTGAATACAGC
VHCDR2：ATAAATCCTAACAATGGTGGAACT
VHCDR3：GCAAACTAGGTTACGACGGTTTGCCTAC
VLCDR1：CAGAGCCTTGTTCACAGTAATGGAAACACCTAT
VLCDR2：AAAGTTTAC
VLCDR3：TCTCAAAGTACACATGTTCCGTGGACG。
2.根據權利要求1所述的抗CK18單克隆抗體，其特征在于，所述VHCDR1、VHCDR2和VHCDR3的氨基酸序列分別如SEQ ID NOs：1-3所示：
SEQ ID NO：1GYTFTEYS
SEQ ID NO：2INPNNGGT
SEQ ID NO：3ANYGYDGFAY。
3.根據權利要求1所述的抗CK18單克隆抗體，其特征在于，所述VLCDR1、VLCDR2和VLCDR3的氨基酸序列分別如SEQ ID NOs：4-6所示：
SEQ ID NO：4QSLFHRNGNTY
SEQ ID NO：5KVY
SEQ ID NO：6SQSTHVPWT。
4.一種根據權利要求1所述的抗CK18單克隆抗體在CK18-M30包被抗體的應用。
5.根據權利要求4所述的抗CK18單克隆抗體在CK18-M30包被抗體的應用，其特征在于，所述CK18-M30單克隆抗體由雜交瘤細胞株分泌，該雜交瘤細胞株，于2016年3月6日寶藏于中國典型培養物保藏中心，其保藏編號為CCTCC NO：C201646。
6.一種根據權利要求1所述的抗CK18單克隆抗體在制備CK18-M65免疫檢測工具中的應用；
所述免疫檢測工具包括CK18-M65試劑盒。
7.權利要求1所述的抗CK18-單克隆抗體在制備檢測CK18相關性肝病診斷試劑中的應用。
8.一種權利要求1所述的抗CK18單克隆抗體的制備方法，其特征在于，所述CK18的單克隆抗體由雜交瘤細胞株分泌產生；所述雜交瘤細胞株制備方法包含以下步驟：
1)合成含有CK18蛋白N端第237至第246位的一段10個氨基酸的肽段的CK19抗原表位肽作為免疫抗原；
2)用1)制備的多肽免疫小鼠；
3)骨髓瘤細胞懸液和免疫小鼠的脾臟B淋巴細胞進行細胞融合；
4)培養融合后的細胞，測雜交瘤效價，篩選陽性細胞株，獲得所述雜交瘤細胞株。
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