[發明專利]一種均相化學發光測定試劑盒及其應用

在審

• 申請號: 201911420060.8
• 申請日: 2019-12-31
• 公開（公告）號: CN113125704A
• 公開（公告）日: 2021-07-16
• 發明（設計）人: 徐靜心;范樹芹;強中華;李臨
• 申請（專利權）人: 科美診斷技術股份有限公司
• 主分類號: G01N33/543
• 分類號: G01N33/543;G01N33/577
• 代理公司: 北京聿宏知識產權代理有限公司 11372
• 代理人: 劉建軍;吳大建

本發明涉及一種均相化學發光免疫測定試劑盒，其包括至少兩種組合物，其中第一組合物包含第一受體以及與之結合的第一抗體或其結合片段，所述第一抗體或其結合片段是特異性結合被分析物的第一表位的檢測抗體；第二組合物包含第二受體以及與之結合的第二抗體或其結合片段，所述第二抗體或其結合片段是特異性結合被分析物的第二表位的檢測抗體；所述受體與活性氧作用可產生化學發光，所述第一表位和所述第二表位沒有重疊部分；所述第一抗體或其結合片段與被分析物特異性結合的親和力高于所述第二抗體或其結合片段與被分析物特異性結合的親和力；同時，第一抗體或其結合片段與所述第一受體的質量比低于所述第二抗體或其結合片段與第二受體得質量比。

技術領域

本發明屬于均相化學發光檢測技術領域，具體涉及一種均相化學發光測定試劑盒及其應用。

背景技術

自1959年建立放射免疫分析以來，酶免疫分析、熒光免疫分析、化學發光免疫分析(含電化學發光、光激化學發光)等技術相繼建立，特別是以“納米微球”、“全自動化”和“光信號”為特征化學發光免疫分析，已發展至相當成熟階段并得到廣泛應用。無論何種標記免疫分析，它們都源于免疫化學和標記分析的基本原理。所謂“免疫化學”指抗原-抗體特異性結合，給予此種檢測方法的高度特異性；所謂“標記分析”指采用高靈敏的信號分子(放射性核素、熒光素、發光劑等)，確保此種檢測方法的高度敏感性。針對大分子物質(蛋白)而言，具有多個抗原表位(也是抗體結合位置)，常采用雙抗體夾心模式。

發光免疫分析具有很好分析性能，分析特異性、分析靈敏度、自動化操作等較好滿足臨床要求。但是，針對某些特殊指標如hCG、HBs-Ag、AFP等，對功能靈敏度和檢測范圍均有很高的要求，而現有化學發光免疫分析、電化學發光免疫分析、光激化學發光免疫分析等尚存在缺陷，不能有效兼顧功能靈敏度和分析范圍的特殊要求。因此，亟需一種化學發光檢測技術，其能兼顧功能靈敏度和分析范圍的要求。

發明內容

本發明針對現有技術的不足提供了一種均相化學發光測定試劑盒，所述試劑盒中包括“差異性受體微球”(與不同親合力抗體分別偶聯的受體微球的混合物)，進而使得所述試劑盒同時具有優異的功能靈敏度和檢測范圍。

為此，本發明第一方面提供了一種均相化學發光免疫測定試劑盒，其包括至少兩種組合物，其中第一組合物包含第一受體以及與之結合的第一抗體或其結合片段，所述第一抗體或其結合片段是特異性結合被分析物的第一表位的檢測抗體；第二組合物包含第二受體以及與之結合的第二抗體或其結合片段，所述第二抗體或其結合片段是特異性結合被分析物的第二表位的檢測抗體；所述第一抗體或其結合片段和所述第二抗體或其結合片段對于被分析物具有不同的親和力；所述受體與活性氧作用可產生化學發光，

所述第一表位和所述第二表位沒有重疊部分；

所述第一抗體或其結合片段與被分析物特異性結合的親和力高于所述第二抗體或其結合片段與被分析物特異性結合的親和力；同時，

第一抗體或其結合片段與所述第一受體的質量比低于所述第二抗體或其結合片段與第二受體得質量比。

在本發明的一些實施方式中，所述第一抗體或其結合片段與所述第一受體的質量比為1:(10～200)，優選為1:(20～180)，更優選為1:(40～160)。

在本發明的另一些實施方式中，所述第一組合物在所述試劑盒中的濃度高于所述第二組合物在所述試劑盒中的濃度。

在本發明的一些優選的實施方式中，所述第一組合物在所述試劑盒中的質量濃度與所述第二組合物在所述試劑盒中的質量濃度比為(5～100):1，優選為(10～50):1，更優選為(15～25):1。

在本發明的一些具體實施方式中，所述第一組合物在所述試劑盒中的質量濃度為5～500ug/ml，優選為10～250ug/ml，更優選為15～200ug/ml。

在本發明的一些實施方式中，所述第一組合物與所述第二組合物單獨分散在同一種緩沖液中。