[發明專利]一種降低產琥珀酸放線桿菌丁二酸發酵副產物比例的方法

有效

• 申請號: 201911420033.0
• 申請日: 2019-12-31
• 公開（公告）號: CN110964754B
• 公開（公告）日: 2021-09-07
• 發明（設計）人: 李億;王青艷;秦艷;朱婧;梁戈;彭龍云;潘麗霞
• 申請（專利權）人: 廣西科學院
• 主分類號: C12P7/46
• 分類號: C12P7/46;C12N1/20;C12N1/38;C12R1/01
• 代理公司: 北京德崇智捷知識產權代理有限公司 11467
• 代理人: 高琦

1.一種降低產琥珀酸放線桿菌丁二酸發酵副產物比例的方法，其特征在于：按體積比為5-15％的接種量將菌種活化擴繁得到的二級種子接種到發酵培養基中并在發酵進行0～10h之后，往發酵培養基中添加過濾除菌的亞硫酸氫鹽或偏重亞硫酸鹽溶液，所述菌種為丁二酸厭氧發酵的微生物，產琥珀酸放線桿菌(Actinobacillus succinogenes)PZ，保藏編號為CCTCC N0：M2016396，所述亞硫酸氫鹽或偏重亞硫酸鹽溶液的加入量為1g/L-20g/L。

2.根據權利要求1所述的一種降低產琥珀酸放線桿菌丁二酸發酵副產物比例的方法，其特征在于，所述菌種擴繁的方法包括將菌種在厭氧箱于37℃下培養48h后接入液體種子培養基中，于37℃厭氧箱中培養16h，菌種數達3億以上，得到一級種子；按體積比為5％的接種量將一級種子轉接至種子培養基中進行二級擴繁培養8-10h，得到二級種子。

3.根據權利要求1所述的一種降低產琥珀酸放線桿菌丁二酸發酵副產物比例的方法，其特征在于，所述的發酵條件為在充滿CO₂的環境中發酵，調節發酵pH維持在6.5～7.0，并在轉速為100～200r/min、溫度為36～38℃條件下發酵60～72h。

4.根據權利要求1所述的一種降低產琥珀酸放線桿菌丁二酸發酵副產物比例的方法，其特征在于，所述的亞硫酸氫鹽或偏重亞硫酸鹽包括偏重亞硫酸鈉、偏重亞硫酸鉀、亞硫酸氫鈉、亞硫酸氫鉀中的一種或多種。

5.根據權利要求1或2所述的一種降低產琥珀酸放線桿菌丁二酸發酵副產物比例的方法，其特征在于，所述的亞硫酸氫鹽或偏重亞硫酸鹽添加方式為批次補加或者間歇流加的方式。

6.根據權利要求1所述的一種降低產琥珀酸放線桿菌丁二酸發酵副產物比例的方法，其特征在于，所述的發酵培養基的配方按照質量比為：包括葡萄糖50～70，酵母提取物10，玉米漿15，NaHCO₃ 6，(NH₄)₂SO₄ 2，MgCl₂.6H₂O 0.8，CaCl₂ 1，MnCl₂ 0.06，ZnSO₄ 0.06，堿式碳酸鎂40～60。

7.根據權利要求1所述的一種降低產琥珀酸放線桿菌丁二酸發酵副產物比例的方法，其特征在于，種子培養基成分及濃度的配方按照質量比為：葡萄糖20，酵母提取物10，玉米漿5，NaCl 2，NaHCO₃4，NaH₂PO₄ 8.5，K₂HPO₄ 15.5，pH 7.0，115℃滅菌20min。