[發明專利]一種檢測除草劑敵稗的仿生免疫熒光試紙條及其制備方法和應用

在審

• 申請號: 201911416705.0
• 申請日: 2019-12-31
• 公開（公告）號: CN111175510A
• 公開（公告）日: 2020-05-19
• 發明（設計）人: 史西志;張澤明;劉晨曦;張蓉蓉;孫愛麗;陳炯
• 申請（專利權）人: 寧波大學
• 主分類號: G01N33/58
• 分類號: G01N33/58;G01N33/53
• 代理公司: 寧波奧圣專利代理事務所(普通合伙) 33226
• 代理人: 何仲

本發明公開了一種檢測除草劑敵稗的仿生免疫熒光試紙條及其制備方法和應用，特點是包括樣品墊、玻璃纖維膜、硝酸纖維素膜、吸水墊和PVC底板，PVC底板上按順序依次粘附有樣品墊、玻璃纖維膜、硝酸纖維素膜和吸水墊，硝酸纖維素膜上設置有檢測線和質控線，檢測線和質控線上包被有敵稗分子印跡聚合物?量子點復合物，其制備方法包括敵稗分子印跡聚合物?量子點復合物的制備步驟；將敵稗分子印跡聚合物?量子點復合物均勻吸附在硝酸纖維素膜上，形成熒光強度一致的檢測線T線和質控線C線，在PVC底板上按順序依次粘附樣品墊、玻璃纖維膜、硝酸纖維素膜和吸水墊得到試紙條的步驟，優點是選擇性強、靈敏度和準確性高。

技術領域

本發明涉及一種快速檢測環境水體中除草劑類內分泌干擾物敵稗的方法，尤其是涉及一種檢測除草劑敵稗的仿生免疫熒光試紙條及其制備方法和應用。

背景技術

敵稗是一種酰胺類除草劑，對稻苗安全而對稗草有很強的觸殺作用，在我國廣泛應用于多種農作物，在生產、使用的過程中亦可以進入環境造成土壤、水體、大氣的污染。敵稗在植物體內幾乎不輸導，只是在藥劑接觸部位起作用。它的作用機制是多方面的，不僅破壞植物的光合作用，而且還抑制呼吸作用與氧公磷酸化作用，干擾核酸與蛋白質合成等，從而使敏感植物的生理機能受到影響，加速失水、葉片逐漸枯干，最后死亡。動物毒理學研究表明：敵稗會影響肝和脾的正常生理功能，提高間質細胞瘤和淋巴瘤的發病率，所以敵稗對于環境生態和人類健康的影響不容忽視。目前常用的檢測敵稗的技術主要是色譜方法，主要有氣相色譜法（Gas chromatography, GC）、液相色譜質譜聯用法（liquidchromatography-mass spectrometry, LC-MS）、氣相色譜質譜連用法（Gaschromatography-mass spectrometry, GC-MS）。上述方法檢測過程復雜，而且無法實現現場檢測。

仿生免疫層析試紙快速檢測技術是基于仿生免疫層析原理建立起來的一種適用于現場檢測的技術，典型的仿生免疫層析試紙包括樣品墊、PVC底板、檢測線、控制線、玻璃纖維膜和吸收墊。以微孔膜作為固相載體，經滲透和毛細管虹吸作用使待測樣品中的抗原與膜上包被的抗體結合，通過標記墊上標記物來呈現反應結果。定量層析技術，是在傳統仿生免疫層析技術基礎上發展起來的一種新型的定量檢測技術。該技術不但具有操作簡便、檢測快速和便攜性強的優點，還能通過熒光信號的強弱實現檢測結果的定量。而由于熒光信號的漂移、檢測時間不固定等操作原因、試紙條批內不均一、主校準曲線漂移等因素的影響，檢測結果常常發生測定偏差較大問題，從而不能準確真實的反應待測物質的含量，因此，如何提高檢測的精確度及可信度是需要解決的問題。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是提供一種選擇性強、靈敏度和準確性高的檢測除草劑敵稗的仿生免疫熒光試紙條及其制備方法和應用。

本發明解決上述技術問題所采用的技術方案為：一種檢測除草劑敵稗的仿生免疫熒光試紙條，包括樣品墊、玻璃纖維膜、硝酸纖維素膜、吸水墊和PVC底板，所述的PVC底板上按順序依次粘附有樣品墊、玻璃纖維膜、硝酸纖維素膜和吸水墊，所述的硝酸纖維素膜上設置有檢測線和質控線，所述的檢測線和所述的質控線上包被有敵稗分子印跡聚合物-量子點復合物。

所述的檢測線與所述的質控線之間的間隔距離為5 mm，所述的檢測線和所述的質控線之間的硝酸纖維素膜的中間隔斷距離為1 mm。被檢測物通過層析進入檢測線而無法到達控制線。

上述檢測除草劑敵稗的仿生免疫熒光試紙條的制備方法，包括以下步驟：

（1）敵稗配制

采用由環己烷和丙酮按體積比9：1的比例混合而成的溶液為溶劑配制敵稗溶液；

（2）敵稗分子印跡聚合物-量子點(MIP-QDs)復合物的制備