[發(fā)明專利]一種核酸提取試劑盒及提取核酸的方法在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 201911413714.4 | 申請日： | 2019-12-31 |
| 公開（公告）號： | CN111041024A | 公開（公告）日： | 2020-04-21 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 郭文滸;張書祖;薛怡婷;陳浩 | 申請（專利權(quán)）人： | 阿吉安（福州）基因醫(yī)學檢驗實驗室有限公司 |
| 主分類號： | C12N15/10 | 分類號： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 福州市博深專利事務(wù)所(普通合伙) 35214 | 代理人： | 段惠存 |
| 地址： | 350108 福建省福州市*** | 國省代碼： | 福建;35 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 核酸 提取 試劑盒 方法 | ||
1.一種核酸提取試劑盒，其特征在于，包括裂解液、洗滌液I和洗滌液II；所述裂解液包括Tris、EDTA、Tween20、二硫蘇糖醇和異硫氰酸胍。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的核酸提取試劑盒，其特征在于，所述裂解液包括5-100mmol/L的Tris、1-200mmol/L的EDTA、體積百分數(shù)含量為0.1-5％的Tween20、1-5mol/L的二硫蘇糖醇和3-5mol/L的異硫氰酸胍。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的核酸提取試劑盒，其特征在于，所述洗滌液I包括5-6mol/L的異硫氰酸胍，1-200mmol/L的EDTA，以及質(zhì)量百分數(shù)為30-50％的乙醇或40-80％的異丙醇。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的核酸提取試劑盒，其特征在于，所述洗滌液II包括20-200mmol/L的NaCl，以及質(zhì)量百分數(shù)為70-100％的異丙醇或乙醇。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的核酸提取試劑盒，其特征在于，所述裂解液包括5-40mmol/L的Tris。
6.一種提取核酸的方法，其特征在于，包括以下步驟：
步驟1、將裂解液、核酸附著物和待提取樣品混合，得到吸附有核酸的核酸附著物；
步驟2、依次采用洗滌液I、洗滌液II和洗脫液清洗吸附有核酸的核酸附著物，每次清洗后固液分離并收集上清液，取洗脫液固液分離后的上清液，得到核酸；
所述裂解液包括Tris、EDTA、Tween20、二硫蘇糖醇和異硫氰酸胍；
所述洗脫液為無核酸水。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的提取核酸的方法，其特征在于，所述裂解液包括5-100mmol/L的Tris、1-200mmol/L的EDTA、體積百分數(shù)含量為0.1-5％的Tween20、1-5mol/L的二硫蘇糖醇和3-5mol/L的異硫氰酸胍。
8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的提取核酸的方法，其特征在于，所述洗滌液I包括5-6mol/L的異硫氰酸胍，1-200mmol/L的EDTA，以及質(zhì)量百分數(shù)為30-50％的乙醇或40-80％的異丙醇；所述洗滌液II包括20-200mmol/L的NaCl，以及質(zhì)量百分數(shù)為70-100％的異丙醇或乙醇；所述裂解液包括5-40mmol/L的Tris。
9.根據(jù)權(quán)利要求6所述的提取核酸的方法，其特征在于，所述核酸附著物為磁珠、電化學芯片或吸附膜。
10.根據(jù)權(quán)利要求6所述的提取核酸的方法，其特征在于，所述步驟1中裂解液、核酸附著物和待提取樣品混合的溫度為10-40℃，混合的時間為2-8min。
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