[發(fā)明專利]一種針對腫瘤疫苗免疫響應(yīng)檢測的陽性多肽池及其制備方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201911410007.X
• 申請日: 2019-12-31
• 公開（公告）號: CN111040039B
• 公開（公告）日: 2021-08-27
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 莫凡;黃勤學(xué);陳霖;林志偉;韓寧
• 申請（專利權(quán)）人: 杭州紐安津生物科技有限公司
• 主分類號: C07K19/00
• 分類號: C07K19/00;G01N33/68;G01N33/574
• 代理公司: 杭州裕陽聯(lián)合專利代理有限公司 33289
• 代理人: 金方瑋

1.一種針對腫瘤疫苗免疫響應(yīng)檢測的陽性多肽池，其特征在于，由以下多肽組成；

所述多肽為：

將能夠與MHC I型分子結(jié)合并被高效遞呈、引起免疫應(yīng)答的表位肽序列，標(biāo)記為A段序列；

將能夠與MHC II型分子結(jié)合并被高效遞呈、引起免疫應(yīng)答的表位肽序列，標(biāo)記為B段序列；

通過連接氨基酸的linker序列連接A段序列和B段序列，設(shè)計得到A-L-B或B-L-A結(jié)構(gòu)的多肽序列；

將標(biāo)記為A段序列的23條CEF表位肽分別單獨通過linker序列與標(biāo)記為B段序列的Tetanus Toxin 830-844連接并合成組合肽，使其長度達(dá)到20-35個氨基酸；Tetanus Toxin830-844的抗原信息是由APC通過MHC II，遞呈給CD4+ T細(xì)胞，23條CEF表位肽的抗原信息是由APC通過MHC I，遞呈給CD8+ T細(xì)胞；

所述多肽的序列包括：

VSDGGPNLY-KK-QYIKANSKFIGITEL；

CTELKLSDY-KK-QYIKANSKFIGITEL；

GLCTLVAML-KK-QYIKANSKFIGITEL；

GILGFVFTL-KK-QYIKANSKFIGITEL；

NLVPMVATV-KK-QYIKANSKFIGITEL；

ILRGSVAHK-K-QYIKANSKFIGITEL；

RVRAYTYSK-K-QYIKANSKFIGITEL；

RLRAEAQVK-K-QYIKANSKFIGITEL；

IVTDFSVIK-K-QYIKANSKFIGITEL；

ATIGTAMYK-K-QYIKANSKFIGITEL；

DYCNVLNKEF-KK-QYIKANSKFIGITEL；

KTGGPIYKR-KK-QYIKANSKFIGITEL；

RKTPRVTGGGAMAGA-KK-QYIKANSKFIGITEL；

RPPIFIRRL-KK-QYIKANSKFIGITEL；

QAKWRLQTL-KK-QYIKANSKFIGITEL；

FLRGRAYGL-KK-QYIKANSKFIGITEL；

RAKFKQLL-KK-QYIKANSKFIGITEL；

ELRSRYWAI-KK-QYIKANSKFIGITEL；

RRIYDLIEL-KK-QYIKANSKFIGITEL；

SRYWAIRTR-KK-QYIKANSKFIGITEL；

YPLHEQHGM-KK-QYIKANSKFIGITEL；

EENLLDFVRF-KK-QYIKANSKFIGITEL；

QEFFWDANDIYRIFA-KK-QYIKANSKFIGITEL。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種針對腫瘤疫苗免疫響應(yīng)檢測的陽性多肽池，其特征在于，由以下多肽組成；所述多肽的序列為：

GILGFVFTL-KK-QYIKANSKFIGITEL；

NLVPMVATV-KK-QYIKANSKFIGITEL；

IVTDFSVIK-K-QYIKANSKFIGITEL。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種針對腫瘤疫苗免疫響應(yīng)檢測的陽性多肽池的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：

步驟一，挑選CEF其中多條與Tetanus Toxin 830-844連接，兩序列間增加兩個賴氨酸K連接，得到多條多肽序列；

步驟二，將多肽序列合成為多肽，得到純度大于95%的多肽制劑，制成多肽凍干粉，灌裝，避光密封保存，貯存溫度-20℃，使用前用生理鹽水溶解成相應(yīng)濃度。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種針對腫瘤疫苗免疫響應(yīng)檢測的陽性多肽池的制備方法，其特征在于，將多肽序列合成為多肽的方法包括：化學(xué)合成方法或基因重組技術(shù)。