[發明專利]白介素-12注射液純度的檢測方法

有效

• 申請號: 201911409432.7
• 申請日: 2019-12-31
• 公開（公告）號: CN110988216B
• 公開（公告）日: 2022-06-21
• 發明（設計）人: 劉忠凱;魏文;王彥娜;王媛媛
• 申請（專利權）人: 康立泰生物醫藥（青島）有限公司
• 主分類號: G01N30/06
• 分類號: G01N30/06;G01N30/74
• 代理公司: 青島清泰聯信知識產權代理有限公司 37256
• 代理人: 張潔

本發明提出一種白介素?12注射液純度的檢測方法，屬于醫學檢驗和藥物分析領域。本發明提供的檢測方法主要包括了待測樣品制備、流動相配制、色譜檢測等步驟，通過優化流動相配比、調整待測樣品上樣方式、調整檢測時間、檢測波長和柱溫等條件，進一步提高了檢測的專屬性、檢測限和耐用性，采用該方法也能得到精確度更高、更為可靠的檢測數據。本發明提供的檢測方法在醫學檢驗和藥物分析領域具有十分廣闊的應用前景，具有較大的實際應用價值。

技術領域

本發明屬于醫學檢驗和藥物分析領域，尤其涉及一種白介素-12注射液純度的檢測方法。

背景技術

白介素-12注射液是一種具有廣泛生物學活性的細胞生長因子，屬于生物藥物。生物藥物通常有穩定性差等的缺陷，因此其注射液的純度是需要重點關注的質量指標之一。

反相高效液相色譜的固相載體具有疏水性，可以根據流動相中被分離物質疏水性的不同而發生強弱不同的相互作用，從而使不同分子在反相柱中彼此分離。但采用上述的反相高效液相色譜法測定人白介素-12的純度時，存在檢測的專屬性、檢測限、精密度等方面仍存在缺陷，尚未取得理想的研究成果，因此研究出一種專屬性、檢測限、精密度高的人白介素-12注射液純度的檢測方法是本領域技術人員亟待解決的問題。

發明內容

本發明針對現有技術存在的專屬性、檢測限、精密度等方面的缺陷，提出一種適用于白介素-12的純度檢測方法，同時該方法還兼具精密度高、數據可靠等特點。

為了達到上述目的，本發明采用的技術方案為：

本發明提供了一種白介素-12注射液純度的檢測方法，所述方法的流動相及色譜條件為：

流動相條件為：包括流動相A和流動相B，所述流動相A為0.05％的三氟乙酸水溶液，所述流動相B為0.05％的三氟乙酸乙腈溶液；

色譜條件為：色譜柱為YMC C4液相色譜柱，250mm×4.6mm I.D.S-5μm；

洗脫時間及所述洗脫時間內所述流動相B的體積含量如下：

0-5min，20％；5-25min，20～70％；25-26min，70～100％；26-35min，100～100％；35-35.5min，100～20％；35.5-40min，20～20％；

所述流動相A和流動相B的流速為0.9～1.1ml/min；

所述色譜柱的柱溫為25-30℃；

檢測波長為280-300nm。

作為優選，所述待測樣品的濃度為6～20μg/ml，更優選地，所述待測樣品的濃度優選為15μg/ml。

作為優選，所述待測樣品的上樣量為100～1000μl。

作為優選，所述流動相配置的方法具體為：

流動相A：用移液槍吸取三氟乙酸0.5mL至1L容量瓶中，加水定容后，靜置處理后，上機檢測，所述靜置處理時長≥5min；

流動相B：用移液槍吸取三氟乙酸0.5mL至1L容量瓶中，加乙腈定容后，進行超聲處理脫氣，備用；

所述超聲處理脫氣時長為≥20min。

與現有技術相比，本發明的優點和積極效果在于：

本發明提供的檢測方法通過調整流動相配比、待測樣品上樣方式、檢測時間、檢測波長和柱溫等條件，意料之外地發現提高了檢測的專屬性、檢測限和耐用性，同時采用該檢測方法進行純度分析能取得精確、可靠的檢測結果，在藥物分析和檢測領域具有十分廣闊的應用前景。

附圖說明

圖1為本發明實施例所提供的流動相A的色譜圖；