[發(fā)明專利]一種污染物對(duì)斑馬魚生物毒性影響的評(píng)價(jià)方法

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201911409214.3
• 申請(qǐng)日: 2019-12-31
• 公開（公告）號(hào): CN111189999A
• 公開（公告）日: 2020-05-22
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 穆希巖;李應(yīng)仁;劉佳;袁立來;黃瑛;朱鋒;李緒興
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國水產(chǎn)科學(xué)研究院
• 主分類號(hào): G01N33/50
• 分類號(hào): G01N33/50
• 代理公司: 北京風(fēng)雅頌專利代理有限公司 11403
• 代理人: 張擁

本發(fā)明提供一種污染物對(duì)斑馬魚生物毒性影響的評(píng)價(jià)方法，包括采用斑馬魚胚胎、斑馬魚仔魚和斑馬魚成魚分別進(jìn)行毒性試驗(yàn)，分別獲得不同生長階段斑馬魚的LC₅₀值和/或亞致死劑量；選取LC₅₀值和/或亞致死劑量最低的生長階段斑馬魚作為最敏感階段斑馬魚；采用最敏感階段斑馬魚的LC₅₀值和/或亞致死劑量評(píng)價(jià)污染物的毒性強(qiáng)弱；該評(píng)價(jià)方法通過對(duì)不同生長階段斑馬魚分別進(jìn)行毒性試驗(yàn)，能夠根據(jù)污染物對(duì)不同階段斑馬魚的生物毒性差異確定最敏感階段斑馬魚，通過對(duì)斑馬魚最敏感階段的確定，對(duì)斑馬魚的保護(hù)工作具有重要指導(dǎo)意義；另外，以最敏感階段斑馬魚的生物毒性評(píng)價(jià)污染物的毒性強(qiáng)弱，提高了污染物毒性評(píng)價(jià)的準(zhǔn)確性。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及污染物毒性評(píng)價(jià)技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種污染物對(duì)斑馬魚生物毒性影響的評(píng)價(jià)方法。

背景技術(shù)

隨著中國工農(nóng)業(yè)的迅猛發(fā)展，越來越多的化學(xué)污染物，可通過各種途徑進(jìn)入且共存于環(huán)境中，并可通過食物鏈傳遞等途徑進(jìn)入人體。而這些污染物大多具備毒性效應(yīng)，給生態(tài)環(huán)境和人類健康造成了嚴(yán)重的影響，尤其是水體中有毒污染物引起的生態(tài)毒性效應(yīng)亟需引起人們的高度重視。

魚類作為水生環(huán)境中最主要的脊椎動(dòng)物，是化學(xué)污染物的主要危害對(duì)象。魚類在水生環(huán)境中的非正常生長、發(fā)育、死亡，提醒我們必須對(duì)農(nóng)藥等化學(xué)品的使用引起的水環(huán)境污染給予足夠的重視.目前，魚類毒性試驗(yàn)是評(píng)價(jià)污染物環(huán)境風(fēng)險(xiǎn)的主要方法之一。

目前，有大量研究關(guān)注有毒物質(zhì)在短期或長期接觸后對(duì)魚類的負(fù)面影響；然而，主要針對(duì)某個(gè)特定的生命階段，如成年，仔魚，特別是胚胎或胚胎-仔魚階段；盡管基于動(dòng)物試驗(yàn)的3Rs(替代，減少和改進(jìn))原則，魚類胚胎試驗(yàn)較傳統(tǒng)的成年魚類試驗(yàn)相比，具有一定優(yōu)勢(shì)；但是，仍有許多的不確定因素導(dǎo)致胚胎試驗(yàn)的結(jié)果無法準(zhǔn)確預(yù)測(cè)魚類的急性毒性結(jié)果；例如，魚類胚胎的絨毛膜可能成為某些化學(xué)品與胚胎幼體的接觸屏障，進(jìn)而導(dǎo)致毒性降低；再如，魚類胚胎可能沒有像成年個(gè)體那樣發(fā)育完全的代謝途徑，對(duì)化學(xué)污染物的代謝解毒能力較弱，導(dǎo)致毒性增加；因此，針對(duì)胚胎試驗(yàn)的結(jié)果無法準(zhǔn)確預(yù)測(cè)魚類的毒性結(jié)果。

此外，采用全周期毒性暴露試驗(yàn)方法能夠模仿環(huán)境中生物的暴露情況，并且數(shù)據(jù)全面系統(tǒng)；然而，該方法試驗(yàn)周期跨度大，對(duì)試驗(yàn)過程中儀器設(shè)備(一般需要流水式暴露設(shè)備)和周邊環(huán)境的要求極為嚴(yán)格，操作難度大，且需要耗費(fèi)大量人力和時(shí)間。

發(fā)明內(nèi)容

有鑒于此，本發(fā)明的目的在于提出一種污染物對(duì)斑馬魚生物毒性影響的評(píng)價(jià)方法，以解決針對(duì)單一生長階段斑馬魚的毒性試驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確度較低，以及全周期毒性暴露試驗(yàn)方法存在操作難度大、費(fèi)時(shí)費(fèi)力的問題。

基于上述目的，本發(fā)明提供了一種污染物對(duì)斑馬魚生物毒性影響的評(píng)價(jià)方法，所述評(píng)價(jià)方法包括如下步驟：

(a)采用斑馬魚胚胎、斑馬魚仔魚和斑馬魚成魚分別進(jìn)行毒性試驗(yàn)，分別獲得不同生長階段斑馬魚的LC₅₀值和/或亞致死劑量；

(b)選取LC₅₀值和/或亞致死劑量最低的生長階段斑馬魚作為最敏感階段斑馬魚；

(c)采用最敏感階段斑馬魚的LC₅₀值和/或亞致死劑量評(píng)價(jià)污染物的毒性強(qiáng)弱。

上述評(píng)價(jià)方法通過對(duì)不同生長階段斑馬魚分別進(jìn)行毒性試驗(yàn)，能夠根據(jù)污染物對(duì)不同階段斑馬魚的生物毒性差異確定最敏感階段斑馬魚，通過對(duì)斑馬魚最敏感階段的確定，對(duì)斑馬魚的保護(hù)工作具有重要指導(dǎo)意義；另外，以最敏感階段斑馬魚的生物毒性評(píng)價(jià)污染物的毒性強(qiáng)弱，提高了污染物毒性評(píng)價(jià)的準(zhǔn)確性；此外，上述評(píng)價(jià)方法采用設(shè)備簡單，易于操作，而且試驗(yàn)過程快速，評(píng)價(jià)結(jié)果可靠。

可選地，所述污染物可以為持久性有機(jī)污染物(POPs)、重金屬、抗生素、農(nóng)藥、微塑料、人工納米材料等。