[發明專利]一種獼猴桃對潰瘍病抗性的鑒定方法

在審

• 申請號: 201911408112.X
• 申請日: 2019-12-31
• 公開（公告）號: CN111057741A
• 公開（公告）日: 2020-04-24
• 發明（設計）人: 朱立武;葉振風;賈兵;何道秋;衡偉;劉莉;劉普
• 申請（專利權）人: 安徽農業大學
• 主分類號: C12Q1/18
• 分類號: C12Q1/18;C12Q1/04;C12N1/20;C12R1/38
• 代理公司: 安徽匯樸律師事務所 34116
• 代理人: 劉海涵

本發明公開了一種獼猴桃對潰瘍病抗性的鑒定方法，涉及農業栽培技術領域，該方法包括以下步驟：首先制備接菌器官，在春季將獼猴桃不同種類品種一年生嫁接苗盆栽，新梢長至3?6個月后，選擇完全木質化的新梢節間作為接種器官；然后進行菌株活化和定量，之后將活化后的細菌懸浮液穿刺接入接種器官，20天后在發病部位剖去長度為15mm、寬5mm的韌皮部，測量發病病斑縱徑大小，并做差異顯著性分析；本發明提供的方法具有操作簡便、鑒定快速、結果準確等特點。

技術領域

本發明涉及農業栽培技術領域，尤其涉及的是一種獼猴桃對潰瘍病抗性的鑒定方法。

背景技術

獼猴桃細菌性潰瘍病(kiwifruit bacterial canker)是一種由丁香假單胞菌獼猴桃致病種(Pseudomonas syringae pv.actinidiae,Psa)引起的毀滅性病害，嚴重威脅獼猴桃生產發展。其發生范圍廣、傳播快、致病性強、防治難度大，可在短期內造成大面積樹體死亡，已被列為我國森林植物檢疫性病害。該病于1989年在日本靜岡首次發現并鑒定其病原物，目前已在美國、日本、法國，新西蘭，韓國、伊朗、意大利、葡萄牙及智利等國，及我國陜西、安徽、重慶、四川、湖北、湖南、河南和河北等省市發生，給世界獼猴桃產業造成了嚴重的經濟損失。

自2008年以來，獼猴桃潰瘍病突然在新西蘭、意大利、中國、智利等獼猴桃主要生產大國大規模爆發，主要為害‘Hort16A’、‘紅陽’等具有重要經濟價值的品種。以新西蘭為例，2010年11月出現嚴重危害，截至2013年2月20日，已有2073個獼猴桃園確認感染了致病力最強的潰瘍病病原菌PSA-V，約占新西蘭獼猴桃園總面積的70％；受潰瘍病的影響，2012年新西蘭獼猴桃出口量從2011年的41.47萬噸降至32.40萬噸，同比減少21％；2013-2014年獼猴桃出口量將進一步減少。該病害在我國陜西、四川、貴州等獼猴桃主產區普遍發生，不同地域、海拔、栽培品種的果園均可能感染，病株率普遍達到20％左右，感染嚴重的果園達到70％以上，很多果園因死樹率過高而導致毀園，損失慘重。

目前，獼猴桃潰瘍病的感染范圍正逐漸擴大，其遠距離傳播主要通過苗木、接穗的引種，對于該病的侵染原理、流行規律、快速鑒定及防治等方面研究，雖然取得一些進展，但由于此病害流行迅速、難以防控、危害巨大，選擇抗性種質資源、培育抗病品種顯得尤為重要。然而，對于獼猴桃對潰瘍病抗性的鑒定技術及其應用，國內外迄今尚未見報道。

新西蘭學者初步研究表明，‘紅陽’感病率最高，‘Hort16A’、‘Gold3’、‘Gold9’、‘海沃德’的感病率逐漸降低，‘Green14’的抗病性最好。在我國，張學武等(2000年)研究表明，‘秦美’潰瘍病發病最嚴重，而‘秦香’、‘秦翠’發病率很低；李淼等(2004年)對安徽省內主栽的7個獼猴桃品種進行潰瘍病的抗性研究，發現‘金魁’與‘魁蜜’為抗病的品種，‘早鮮’、‘華美2號’、‘海沃德’中感，‘秦美’、‘金豐’最感病；申哲、高小寧等(2009-2011年)分別對陜西省不同品種獼猴桃潰瘍病的發生率進行研究表明，‘紅陽’感病率最高，‘海沃德’、‘亞特’及‘秦美’感病率依次降低，‘徐香’抗性較強。

但是，由于上述各項研究主要通過田間抗性實際調查方法，采用的操作和統計方法存在差異，且植株的生長環境，園區管理程度不同，因此，還無法對獼猴桃各個品種資源的抗潰瘍病的能力做出系統與客觀的評價。另外，國內外對獼猴桃品種抗病機理研究較少，基于獼猴桃抗病的形態學、細胞學及生理生化等特征雖有研究報道，目前尚不能用于品種資源的抗性準確鑒定。

發明內容

本發明的目的在于克服現有技術的不足，提供了一種獼猴桃對潰瘍病抗性的鑒定方法。

本發明是通過以下技術方案實現的：一種獼猴桃對潰瘍病抗性的鑒定方法，該方法包括以下步驟：

步驟1、制備接菌器官