[發(fā)明專利]一種高抗性淀粉和低谷蛋白聚合的水稻品種的選育方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201911405701.2
• 申請日: 2019-12-31
• 公開（公告）號: CN111084096B
• 公開（公告）日: 2021-11-02
• 發(fā)明（設計）人: 楊瑞芳;白建江;樸鐘澤;萬常照
• 申請（專利權）人: 上海市農業(yè)科學院
• 主分類號: A01H1/02
• 分類號: A01H1/02;C12Q1/6895;C12N15/11
• 代理公司: 北京瑞恒信達知識產(chǎn)權代理事務所(普通合伙) 11382
• 代理人: 張偉

1.一種高抗性淀粉和低谷蛋白聚合的水稻品種的選育方法，所述選育方法包括以下步驟：

(1) 以降糖稻1號或其它包含sbe3-rs基因的衍生品種為親本I，所述親本I的抗性淀粉含量大于10%，以包含低谷蛋白Lgc-1基因的水稻品種為親本II，所述親本II的谷蛋白含量小于3%，雜交獲得F1代種子；

(2) 將F1代與親本I回交，獲得BC1F1代種子，種子打糙米，篩選堊白度大于70%的種子；

(3) 種植步驟(2)得到的BC1F1代種子，取樣提取DNA，通過高抗性淀粉CAPS分子標記檢測和低谷蛋白KASP分子標記檢測，篩選得到sbe3-rs基因型純合和Lgc-1基因型雜合的單株，獲得BC1F2代種子；

(4) 種植BC1F2代種子，取樣提取DNA，通過低谷蛋白KASP分子標記檢測，篩選得到sbe3-rs基因型和Lgc-1基因型均純合的單株，獲得BC1F3代種子，種子打精米，磨粉后測定抗性淀粉含量和谷蛋白含量，篩選得到種子的抗性淀粉含量大于10%、谷蛋白含量小于3%的單株留種；

(5) 種植步驟(4)得到的BC1F3代種子，連續(xù)自交直至獲得BC1F5代種子；

(6) 種植BC1F5代種子，選擇畝產(chǎn)在400公斤以上的品種；

其中所述低谷蛋白KASP分子標記檢測包括：采用以下引物對提取的DNA進行PCR擴增和檢測，然后基于擴增產(chǎn)物的檢測進行基因型的分型：

引物1：5’-TGCTGGCATGGTAGGACAAAATTG-3’；

引物2：5’-CTTGCTGGCATGGTAGGACAAAATTT-3’；

通用引物3：5’-AACGGTTTAGATGAGAACTTCTGCACAAT-3’；

通用引物4：5’-AAAACAATACTGACACGCCACACACAAT-3’，

使引物1的5’端連接FAM熒光標簽，引物2的5’端連接HEX熒光標簽，然后根據(jù)擴增產(chǎn)物的熒光信號進行鑒定，選擇呈現(xiàn)綠色的植株。

2.根據(jù)權利要求1所述的選育方法，其特征在于，步驟(1)中，包含sbe3-rs基因的衍生品種為優(yōu)糖稻2號或優(yōu)糖稻3號。

3.根據(jù)權利要求1或2所述的選育方法，其特征在于，所述親本II為日本低谷蛋白品種LGC-1。

4.根據(jù)權利要求1或2所述的選育方法，其特征在于，從單株的葉片提取基因組DNA。

5.根據(jù)權利要求1或2所述的選育方法，其特征在于，步驟(4)中還進行高抗性淀粉CAPS分子標記檢測；

或者，步驟(5)中種植的每一代單株進行高抗性淀粉CAPS分子標記檢測和低谷蛋白KASP分子標記檢測。

6.根據(jù)權利要求1或2所述的選育方法，其特征在于，所述高抗性淀粉CAPS分子標記檢測包括：

采用以下引物對提取的DNA進行PCR擴增，然后基于擴增產(chǎn)物的檢測進行基因型的分型：

PCR-SpeI F：5’-ATGTGATGTGCTGGATTTGG-3’；

PCR-SpeI R：5’-TGTGGTTTTCATACCGTTCTTA-3’。

7.根據(jù)權利要求6所述的選育方法，其特征在于，采用限制性內切酶SpeI對獲得的擴增產(chǎn)物進行酶切鑒定。

8.根據(jù)權利要求1或2所述的選育方法，其特征在于，步驟(5)或步驟(6)還包括篩選農藝性狀優(yōu)良的單株。

9.根據(jù)權利要求8所述的選育方法，其特征在于，所述農藝性狀優(yōu)良包括以下中的一種或多種：株型緊湊、產(chǎn)量高、抗病性強、抗倒伏。