[發明專利]一種乳清蛋白粉中三聚氰胺濃度的檢測方法

在審

• 申請號: 201911393478.4
• 申請日: 2019-12-30
• 公開（公告）號: CN111751302A
• 公開（公告）日: 2020-10-09
• 發明（設計）人: 楊世玉;周真;王燕兵
• 申請（專利權）人: 哈爾濱理工大學
• 主分類號: G01N21/31
• 分類號: G01N21/31;G01N1/38
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.基于紫外-可見光譜的乳清蛋白懸濁液中三聚氰胺含量的檢測方法，其特征在于，所述檢測方法包括如下步驟：

（1）配置不同濃度的三聚氰胺水溶液，配置乳清蛋白懸濁液，將不同濃度的三聚氰胺水溶液與乳清蛋白懸濁液混合，得到待測三聚氰胺與乳清蛋白混合待測液；

（2）采用紫外-可見分光光度計采集不同濃度待測三聚氰胺的乳清蛋白混合液的紫外-可見光譜；

（3）采用多元散射矯正法（MSC）對紫外-可見光譜進行數據預處理，校正光譜基線以及矯正蛋白質大分子引起的散射問題；

（4）采用二維相關分析法對矯正后過的光譜數據進行二維相關分析，提取三聚氰胺特征吸收峰對應的特征波長，用于建立吸光度與濃度預測模型；

（5）利用SG卷積平滑法平滑三聚氰胺光譜曲線減弱高頻噪聲的干擾；

（6）采用遺傳算法+BP人工神經網絡建立特征吸收波段與三聚氰胺濃度之間的預測模型，實現對乳清蛋白粉中三聚氰胺的定量檢測。

2.根據權利要求1所述的基于紫外-可見光譜的乳清蛋白粉中三聚氰胺濃度的檢測方法，其特征在于，所述步驟（1）配置不同濃度的三聚氰胺水溶液，配置乳清蛋白懸濁液，將不同濃度的三聚氰胺水溶液與乳清蛋白懸濁液混合，得到待測三聚氰胺與乳清蛋白混合待測液步驟如下：

取0.1g三聚氰胺粉末溶于100ml常溫蒸餾水中，得到濃度為0.001g/ml的三聚氰胺溶液，再取出1ml三聚氰胺水溶液加入9ml的常溫蒸餾水中，獲得濃度為0.0001g/ml的三聚氰胺水溶液,再取出1ml濃度為0.0001g/ml的三聚氰胺水溶液加入9ml的常溫蒸餾水中，獲得濃度為0.00001g/ml的三聚氰胺溶液，將5g乳清蛋白粉置于400ml的燒杯中，加入100ml的常溫蒸餾水中，在磁力攪拌器上攪拌均勻，成為懸濁液，然后放入均質器中進行均質兩分鐘，依次配置不同濃度的三聚氰胺溶液，將不同濃度的三聚氰胺溶液分別加入蛋白粉懸濁液中，以上步驟得到待測不同濃度三聚氰胺乳清蛋白粉懸濁液。

3.根據權利要求1所述的基于紫外-可見光譜的乳清蛋白粉中三聚氰胺含量的光譜采集方法其特征在于，所述步驟（2）利用紫外-可見分光光度計進行了光譜數據的采集，將光譜檢測范圍設定為200~900nm，采樣間隔1nm，基線校正空白樣和對照組均為常溫蒸餾水，從待測懸濁液中吸取5mL于石英比色皿中，每個濃度的三聚氰胺樣品重復測量3次，剔除異常數據并取其均值作為測量結果，本發明共進行了5次獨立完整的實驗得到原始光譜數據203組，經過對光譜的初步篩選選取40組作為最終預測建模的初始數據。

4.根據權利要求1所述的基于紫外-可見光譜的乳清蛋白粉中三聚氰胺含量的檢測方法的檢測方法，其特征在于，所述步驟（3）使用多元散射矯正法（MSC）校正乳清蛋白懸濁液中豐富的蛋白質大分子散射，有效解決了因蛋白質散射引起的基線漂移和光譜中噪聲干擾現象，使光譜信息更加準確，增加建模結果的準確性。

5.根據權利要求1所述的基于紫外-可見光譜的乳清蛋白粉中三聚氰胺含量的檢測方法，其特征在于，所述步驟（4）中三聚氰胺在乳清蛋白懸濁液中的紫外-可見吸收光譜在300~750nm波段連續出現特征吸收峰，三聚氰胺濃度增大時其特征吸收峰也增大，由于三聚氰胺體內含有的不飽和共軛雙鍵，與乳清蛋白質中氨基酸成分相重疊，從而導致光譜信息中出現特征波峰強度增大、吸收譜帶紅移等問題，三聚氰胺在乳清蛋白懸濁液的背景下與水溶液背景下的特征吸收峰發生了改變，因此需要重新確定發生了紅移后的特征吸收峰位置。

6.根據權利要求1所述的基于紫外-可見光譜的乳清蛋白粉中三聚氰胺含量的檢測方法，其特征在于，所述步驟（4）中波長為300~750nm的三聚氰胺紫外光譜采用二維相關分析法進行拾取與分析光譜特征，以濃度為外擾因素，獲得最符合三聚氰胺的紫外可見光譜的吸收峰值，以吸收峰值對應的特征波段確定為300nm-750nm。