[發明專利]一種鑒定不同品種油菜抗蚜性的方法

有效

• 申請號: 201911383812.8
• 申請日: 2019-12-28
• 公開（公告）號: CN111157678B
• 公開（公告）日: 2022-11-08
• 發明（設計）人: 郝仲萍;侯樹敏;詹海霞
• 申請（專利權）人: 安徽省農業科學院作物研究所
• 主分類號: G01N33/00
• 分類號: G01N33/00;G01R29/02;A01G7/00;A01K67/033
• 代理公司: 合肥市長遠專利代理事務所(普通合伙) 34119
• 代理人: 楊霞

本發明提出了一種鑒定不同品種油菜抗蚜性的方法，通過利用電子穿刺圖譜技術(Electropenetrography/the Electrical Penetration Graph，EPG)來實現監測蚜蟲在油菜植株上的取食行為，并在這一基礎上，分析出不同品種油菜之間的抗蚜性大小。

技術領域

本發明涉及生物技術領域，尤其涉及一種鑒定不同品種油菜抗蚜性的方法。

背景技術

油菜屬十字花科蕓薹屬，目前生產上栽培的有三種類型：甘藍型、芥菜型和白菜型油菜。油菜是僅次于谷類作物的世界第二大食物能源，是世界上大豆和棉花之后第三個主要的可食用油資源。

然而，油菜生長期常常受到病蟲害的影響，制約產量的增加。大量的病蟲害侵襲，造成油菜大面積毀種和缺苗斷壟，嚴重影響油菜生長。在作物生長過程中，受到十字花科害蟲和病原體的侵害，并且近些年入侵率持續增加，使油菜的產量受到嚴重的制約。其中，影響最大的蟲害就是蚜蟲。蚜蟲是油菜上的重要害蟲，是刺吸式口器的代表性昆蟲，取食植物時將口針刺入植物組織表皮細胞和薄壁細胞間，插入篩管內，口針分泌出膠狀唾液和水狀唾液保護口針并且防止植物組織愈合，從而可以長時間不斷地取食植物韌皮部汁液，獲得碳水化合物，氨基酸，礦物質，維生素以及大分子物質。在生長初期，蚜蟲多集中于油菜葉背或嫩葉部取食，造成葉片變色、卷曲以及褶皺；在開花結角期，該蟲多群集于花蕾、花梗或莢果處，造成花梗扭曲，莢果畸形，從而出現有花不能結角，有果籽不實的現象，嚴重時可造成植株死亡，而且蚜蟲還可以增加病毒傳播。

到目前為止，抗蟲油菜品種還沒有商業化。農民倚賴殺蟲劑來抑制蚜蟲，但選擇壓導致蚜蟲已經對許多殺蟲劑產生了抗性。此外，殺蟲劑對環境的消極影響表明替代的防治策略和培育抗性品種是急需的。而培育抗性品種，首先要定位植株上的抗性因子，才能找到著手點。了解蚜蟲探測和取食的行為對于研究植株對蚜蟲的適應性，探索抗性因子有著重要的意義。

傳統鑒定油菜抗蚜的方法都是以在室內和田間接種蚜蟲之后，觀察油菜植株的感蚜的情況來確定，需要花費大量的人力，物力和財力，而且還要長期在室內飼養蚜蟲種群，如果不保存這些物種，需要從田間去采集，田間的蚜蟲長期受到農藥的影響，產生較大的抗藥性，對實驗的作物也會長期產生適應性，造成評估的不準確。而且受到氣候的影響較大，如果不適發的年限，蚜蟲及病毒病均不易采集到，實驗也會受到影響。而且傳統的方法人為地因素太多，需要大量的重復來降低人為的影響，實驗數據也存在較大的變化，且不能根據實驗結果知道潛在的抗性機理及深層的原因。并且傳統的方法對蚜蟲和病毒病的抗性鑒定需要各自進行接種鑒定，不能一同進行評估。

發明內容

基于背景技術存在的技術問題，本發明提出了一種鑒定不同品種油菜抗蚜性的方法，通過利用電子穿刺圖譜技術(Electropenetrography/the Electrical PenetrationGraph，EPG)來實現監測蚜蟲在油菜植株上的取食行為，并在這一基礎上，分析出不同品種油菜的抗蚜性大小。

為實現上述目的，本發明采取以下技術方案：

一種采集蚜蟲對油菜取食行為的EPG參數的方法，包括如下步驟：

(1)將甘藍蚜用導電銀膠將金絲一端固定于背部后，放置于繁育蚜蟲的植株上過夜適應；同時選擇油菜植株作為測試對象；

(2)將金絲的另外一端接到DC-EPG系統上，同時將植物電極插入植株土壤中，再將饑餓處理后且連接金絲的甘藍蚜置于油菜植株上，在法拉第籠中進行試驗；

當甘藍蚜的口針刺入植物組織時，由甘藍蚜口針為微電極和植物根部土壤為參比電極構成的回路接通，獲取甘藍蚜在油菜植株上對應至少6h取食行為所產生的一系列電信號；

(3)將上述電信號經DC-EPG系統放大處理后，轉化成數字信號，再以波形數據的形式進行記錄，獲取蚜蟲在油菜上對應取食行為的EPG波形；