[發明專利]一種鑒定不同品種油菜抗蚜性的方法

有效

• 申請號: 201911383812.8
• 申請日: 2019-12-28
• 公開（公告）號: CN111157678B
• 公開（公告）日: 2022-11-08
• 發明（設計）人: 郝仲萍;侯樹敏;詹海霞
• 申請（專利權）人: 安徽省農業科學院作物研究所
• 主分類號: G01N33/00
• 分類號: G01N33/00;G01R29/02;A01G7/00;A01K67/033
• 代理公司: 合肥市長遠專利代理事務所(普通合伙) 34119
• 代理人: 楊霞

1.一種鑒定不同品種油菜抗蚜性的方法，其特征在于，包括如下步驟：

S1、采用不同品種的油菜植株作為測試對象，獲取甘藍蚜對各品種油菜植株取食行為的EPG 參數；

S2、對所述EPG 參數進行篩選，選擇出與油菜抗蚜性鑒定相關性最強的一組EPG參數進行研究；

S3、所述與油菜抗蚜性鑒定相關性最強的一組EPG參數中，若與E1波相關的EPG參數越大，與E2波相關的EPG參數越小，表明該品種的油菜抗蚜性越強，反之則表明該品種的油菜抗蚜性越弱；

所述S1中采集蚜蟲對油菜取食行為的EPG參數的方法，包括如下步驟：

（1）將甘藍蚜用導電銀膠將金絲一端固定于背部后，放置于繁育蚜蟲的植株上過夜適應，同時選擇油菜植株作為測試對象；

（2）將金絲的另外一端接到DC-EPG 系統上，同時將植物電極插入植株土壤中，再將饑餓處理后且連接金絲的甘藍蚜置于油菜植株上，在法拉第籠中進行試驗；

當甘藍蚜的口針刺入植物組織時，由甘藍蚜口針為微電極和植物根部土壤為參比電極構成的回路接通，獲取甘藍蚜在油菜植株上對應至少6h取食行為所產生的一系列電信號；

（3）將上述電信號經DC-EPG系統放大處理后，轉化成數字信號，再以波形數據的形式進行記錄，獲取蚜蟲在油菜上對應取食行為的EPG波形；

（4）將EPG波形進行類比、分析以及認定，參照蚜蟲取食行為與EPG波形的對應關系，將EPG 波形劃分為5種類型：口針在植株外部產生的非刺探波np，口針在表皮以及葉肉中穿刺、唾液分泌以及其它行為產生的路徑波C，口針在細胞內穿刺產生的電勢降pd，口針在韌皮部內分泌唾液產生的分泌波E1和口針在韌皮部取食產生的取食波E2；

（5）將上述EPG波形包含的口針在植株外部產生的非刺探波np、口針在表皮以及葉肉中穿刺、唾液分泌以及其它行為產生的路徑波C、口針在細胞內穿刺產生的電勢降pd、口針在韌皮部內分泌唾液產生的分泌波E1、口針在韌皮部取食產生的取食波E2對應的時間、次數進行統計、篩選，獲得蚜蟲對油菜取食行為的EPG參數；

所述“與E1波相關的EPG參數越大，與E2波相關的EPG參數越小”具體為“E1波占韌皮部階段的百分比越大”，即若E1波占韌皮部階段的百分比越大，表明該品種的油菜抗蚜性越強，反之則表明該品種的油菜抗蚜性越弱；

所述“與E1波相關的EPG參數越大，與E2波相關的EPG參數越小”具體為“E2的總持續期越小”，即若E2的總持續期越小，表明該品種的油菜抗蚜性越強，反之則表明該品種的油菜抗蚜性越弱；

所述與E1波相關的EPG參數包括：d_E1followedby1sE2、s_E1followedbysE2、s_E1、s_E2、s_longestE2；

所述d_E1followedby1sE2為后面接第一個持久E2的E1波的持續期；

所述s_E1followedby1sE2為后面接持久E2的E1的總持續期；

所述s_E1為E1的總持續期；

所述s_E2為E2的總持續期；

所述s_longestE2為最長E2的持續時間；

短暫探測的次數即持續時間＜3min的路徑波C的次數；若短暫探測的次數越多，C波的總占比越高，表明該品種油菜抗蚜性越強，反之則表明該品種的油菜抗蚜性越弱；所述與短暫探測次數相關的EPG參數包括：n_pd/n_Pr、n_bPr；

所述n_pd/n_Pr為每次探測中pd波的平均發生次數；

所述n_bPr為短暫探測的次數；

若探測的總時間越長，非探測的總時間越短，表明該品種的油菜抗蚜性越弱；反之則表明該品種的油菜抗蚜性越強。

2.根據權利要求1所述鑒定不同品種油菜抗蚜性的方法，其特征在于，采集蚜蟲對油菜取食行為的EPG參數的方法步驟（1）中，所述甘藍蚜為新羽化2天的無翅甘藍蚜；所述油菜植株為發育到4葉期的油菜植株。

3.根據權利要求1或2所述鑒定不同品種油菜抗蚜性的方法，其特征在于，采集蚜蟲對油菜取食行為的EPG參數的方法步驟（2）中，所述饑餓處理的時間為1h；所述DC-EPG系統為荷蘭Wageningen University 生產的Giga4 型號的4 通道的DC-EPG 系統；

所述DC-EPG 系統的一個通道只能連接一根長2cm，直徑18μm的金絲，一根金絲也只能連接一頭甘藍蚜。