[發明專利]具有抑制α-葡萄糖苷酶活性的大豆肽及制備方法與應用

在審

• 申請號: 201911375951.6
• 申請日: 2019-12-27
• 公開（公告）號: CN111088310A
• 公開（公告）日: 2020-05-01
• 發明（設計）人: 周雪松;曾建新;蔣文真
• 申請（專利權）人: 廣州合誠實業有限公司
• 主分類號: C12P21/06
• 分類號: C12P21/06;C07K1/34;A23L33/18
• 代理公司: 廣州市華學知識產權代理有限公司 44245
• 代理人: 蘇運貞;裘暉

1.一種具有抑制α-葡萄糖苷酶活性大豆肽的制備方法，其特征在于包含如下步驟：

(1)大豆分離蛋白粉的分散、溶解：用水將大豆分離蛋白粉配制成蛋白漿，水化，升溫至50～60℃；

(2)堿性蛋白酶酶解：將步驟(1)分散混勻好的蛋白漿液的pH值調節為7～9，加入相當于大豆分離蛋白粉質量0.5～3.0％的堿性蛋白酶，在50～60℃條件下恒溫攪拌酶解2h～10h，得到酶解液；

(3)調節酶解液pH、滅酶、離心分離：將步驟(2)得到的酶解液的pH值調節為4.2～4.8，升溫滅酶，固液分離，取液體；

(4)胃蛋白酶酶解：將步驟(3)得到的液體的pH值調至1.8～2.4，加入相當于液體中蛋白質質量1～3％的胃蛋白酶，于35～39℃恒溫攪拌酶解1～3h；

(5)調節酶解液pH、滅酶：將步驟(4)酶解得到的產物的pH值調節為6.5～7.0，將得到的酶解液升溫滅酶；

(6)超濾、納濾：將步驟(5)升溫滅酶得到的酶解液超濾；取超濾得到的透過液進行納濾，完成脫鹽、去游離氨基酸并濃縮，得到濃縮液；

(7)干燥：將濃縮液進行噴霧干燥，得到具有抑制α-葡萄糖苷酶活性的大豆肽。

2.根據權利要求1所述的具有抑制α-葡萄糖苷酶活性大豆肽的制備方法，其特征在于：

步驟(2)中所述的pH值為8～8.5；

步驟(3)中所述的pH值為4.5～4.6；

步驟(4)中所述的pH值為2.0～2.1。

3.根據權利要求1所述的具有抑制α-葡萄糖苷酶活性大豆肽的制備方法，其特征在于：

步驟(1)中所述的水的用量相當于所述的大豆分離蛋白粉質量的6～12倍；

步驟(1)中所述的水化的條件為于2000～3000rpm的剪切速度分散混勻10～20min。

4.根據權利要求1所述的具有抑制α-葡萄糖苷酶活性大豆肽的制備方法，其特征在于：

所述的水為去離子水；

步驟(2)中所述的pH值的調節劑為氫氧化鈉；

步驟(3)中所述的pH值的調節劑為鹽酸；

步驟(4)中所述的pH值的調節劑為鹽酸；

步驟(5)中所述的pH值的調節劑為氫氧化鈉。

5.根據權利要求1所述的具有抑制α-葡萄糖苷酶活性大豆肽的制備方法，其特征在于：

步驟(2)中所述的堿性蛋白酶為菌種Bacillus licheniformis發酵生產分離提純的堿性蛋白酶。

6.根據權利要求1所述的具有抑制α-葡萄糖苷酶活性大豆肽的制備方法，其特征在于：

步驟(2)中所述的攪拌酶解的攪拌速度為小于80rpm；

步驟(3)中所述的升溫滅酶的具體步驟為將酶解液升溫至85～95℃保持10～30min；

步驟(4)中所述的攪拌酶解的攪拌速度為小于80rpm；

步驟(5)中所述的升溫滅酶的具體步驟為將酶解液升溫至80～90℃保持10～20min。

7.根據權利要求1所述的具有抑制α-葡萄糖苷酶活性大豆肽的制備方法，其特征在于：

步驟(6)中所述的超濾是指酶解液經過截留分子量為3000Da的超濾膜超濾，取透過液；

步驟(6)中所述的納濾是指超濾透過液經過孔徑為1nm的納濾膜納濾。

8.根據權利要求1所述的具有抑制α-葡萄糖苷酶活性大豆肽的制備方法，其特征在于：

步驟(6)中所述的濃縮液為固形物含量為20～40％的濃縮液；

步驟(7)中所述的噴霧干燥的操作參數為進口溫度為160～180℃，出口溫度為70～90℃。

9.一種抑制α-葡萄糖苷酶活性的大豆肽，其特征在于：由權利要求1～8任一項所述的制備方法得到；其IC50為0.262～0.295mg/mL。

10.權利要求9所述的具有抑制α-葡萄糖苷酶活性在制備降血糖產品中的應用。