[發(fā)明專利]一種用于蛋白展示和表達(dá)的細(xì)胞株及其制備方法和應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201911367664.0
• 申請日: 2019-12-26
• 公開（公告）號: CN110982790B
• 公開（公告）日: 2022-07-19
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 趙云;范英俊;安莉莉;杭海英
• 申請（專利權(quán)）人: 海珂分子（北京）科技有限責(zé)任公司;中國科學(xué)院生物物理研究所
• 主分類號: C12N5/10
• 分類號: C12N5/10;C12N15/85
• 代理公司: 北京市誠輝律師事務(wù)所 11430
• 代理人: 范盈

1.一種可用于蛋白展示和表達(dá)的CHO細(xì)胞，所述CHO細(xì)胞的基因組中整合有表達(dá)框，其特征在于，所述表達(dá)框包括啟動子、第一重組酶識別序列、目的基因、第二重組酶識別序列、終止子，所述表達(dá)框替換CHO細(xì)胞基因組的YWHAE基因的終止密碼子之后的第1320位至第1525位的堿基區(qū)域。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的可用于蛋白展示和表達(dá)的CHO細(xì)胞，其特征在于，所述第一重組酶選自重組酶Flpo或iCre，所述第二重組酶選自重組酶Flpo或iCre。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的可用于蛋白展示和表達(dá)的CHO細(xì)胞，其特征在于，所述第一重組酶識別序列選自FRT或Loxp，所述第二重組酶識別序列選自FRT或Loxp。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的可用于蛋白展示和表達(dá)的CHO細(xì)胞，其特征在于，所述啟動子選自CMV啟動子，所述終止子選自BGH pA終止子。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的可用于蛋白展示和表達(dá)的CHO細(xì)胞，其特征在于，所述目的基因選自熒光標(biāo)記基因或抗體基因。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的可用于蛋白展示和表達(dá)的CHO細(xì)胞，其特征在于，所述CHO細(xì)胞為CHO-K1細(xì)胞。

7.權(quán)利要求1-6任一所述的可用于蛋白展示和表達(dá)的CHO細(xì)胞在蛋白展示中的應(yīng)用。

8.權(quán)利要求1-6任一所述的可用于蛋白展示和表達(dá)的CHO細(xì)胞在蛋白進(jìn)化或蛋白分泌中的應(yīng)用。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的應(yīng)用，其特征在于，所述蛋白進(jìn)化為抗體進(jìn)化，所述蛋白分泌為抗體分泌，所述表達(dá)框中的目的基因選自抗體基因。