[發明專利]一種維生素B12

有效

• 申請號: 201911365295.1
• 申請日: 2019-12-26
• 公開（公告）號: CN111073922B
• 公開（公告）日: 2023-04-07
• 發明（設計）人: 盧正東;陳情;雷華;夏煒鎧;肖其磊
• 申請（專利權）人: 湖北廣濟藥業股份有限公司
• 主分類號: C12P19/42
• 分類號: C12P19/42;C12N1/20;C12R1/38
• 代理公司: 武漢華旭知識產權事務所 42214
• 代理人: 劉榮

1.一種維生素B₁₂發酵補料培養基補料方法，所述維生素B₁₂發酵補料培養基用于以脫氮假單孢菌為生產菌種發酵生產維生素B₁₂的發酵過程中，其特征在于包括以下步驟：

步驟1：在發酵25-35小時，當總糖含量低于5.0%時補入補料A，所述補料A為葡萄糖300-600g/L，氯化鈷0.3-0.7g/L，5-6二甲基苯并咪唑0.3-0.7g/L，消泡劑0.2-0.5g/L；

步驟2：在發酵35小時后，當甜菜堿含量低于0.5%時補入補料B，所述補料B為甜菜堿250-500g/L，氯化鈷0.3-0.7g/L，5-6二甲基苯并咪唑0.3-0.7g/L,消泡劑0.2-0.5g/L；

步驟3：從步驟1開始補入補料A到發酵70小時，控制總糖含量在4%-5%，發酵70小時后控制總糖含量3.0%-4.0%至放罐；

步驟4：從步驟2開始補入補料B到發酵至130-150小時，控制甜菜堿含量在3%-5%，發酵130-150小時后不再補加甜菜堿；

步驟5：在發酵過程的前20小時，將發酵液溶氧量控制在15%-25%，在發酵過程的20小時后，將發酵液溶氧量控制在5%-15%；

步驟6：從發酵到發酵至130-150小時，補加補料C，所述補料C為甘氨酸300-600g/L，氯化膽堿20-50g/L，氯化鈷0.3-0.7g/L，5-6二甲基苯并咪唑0.3-0.7g/L，消泡劑0.2-0.5g/L，控制甘氨酸含量在0.2-0.5%。

2.一種維生素B₁₂發酵補料培養基，其特征在于：所述維生素B₁₂發酵補料培養基包括補料A、補料B及補料C，所述補料A為葡萄糖300-600g/L，氯化鈷0.3-0.7g/L，5-6二甲基苯并咪唑0.3-0.7g/L，消泡劑0.2-0.5g/L；所述補料B為甜菜堿250-500g/L，氯化鈷0.3-0.7g/L，5-6二甲基苯并咪唑0.3-0.7g/L,消泡劑0.2-0.5g/L；所述補料C為甘氨酸300-600g/L，氯化膽堿20-50g/L，氯化鈷0.3-0.7g/L，5-6二甲基苯并咪唑0.3-0.7g/L，消泡劑0.2-0.5g/L。