[發(fā)明專利]一種食蟹猴淋巴細胞的流式圈門方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201911364355.8
• 申請日: 2019-12-26
• 公開（公告）號: CN113049815A
• 公開（公告）日: 2021-06-29
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 張慧;徐青青;孫玉梅;孫倩;魯雯思
• 申請（專利權(quán)）人: 上海益諾思生物技術(shù)股份有限公司
• 主分類號: G01N33/569
• 分類號: G01N33/569;G01N15/14
• 代理公司: 上海弼興律師事務(wù)所 31283
• 代理人: 薛琦;呂學(xué)辰

1.一種食蟹猴淋巴細胞的流式圈門方法，其特征在于，其包括：通過側(cè)向光和CD45熒光檢測經(jīng)CD45抗體孵育過的食蟹猴全血細胞，圈出食蟹猴全血中的淋巴細胞。

2.如權(quán)利要求1所述的食蟹猴淋巴細胞的流式圈門方法，其特征在于，所述流式圈門方法還包括用CD4熒光圈出經(jīng)CD4抗體孵育過的食蟹猴全血中的CD4⁺T淋巴細胞。

3.如權(quán)利要求1或2所述的食蟹猴淋巴細胞的流式圈門方法，其特征在于，所述流式圈門方法還包括用CD8熒光圈出經(jīng)CD8抗體孵育后的食蟹猴全血中的CD8⁺T淋巴細胞。

4.如權(quán)利要求1-3任一項所述的食蟹猴淋巴細胞的流式圈門方法，其特征在于，所述孵育的時長為45min。

5.如權(quán)利要求1-4任一項所述的食蟹猴淋巴細胞的流式圈門方法，其特征在于，所述流式圈門方法還包括在所述孵育后去除食蟹猴全血中的紅細胞。

6.如權(quán)利要求5所述的食蟹猴淋巴細胞的流式圈門方法，其特征在于，所述除去食蟹猴全血中的紅細胞的方法為用溶血劑孵育。

7.如權(quán)利要求6所述的食蟹猴淋巴細胞的流式圈門方法，其特征在于，用溶血劑孵育的時長為20min。

8.如權(quán)利要求1-7任一項所述的食蟹猴淋巴細胞的流式圈門方法，其特征在于，所述流式圈門方法包括：

1)將抗猴CD45抗體、CD4抗體和CD8抗體加入食蟹猴全血，避光孵育；

2)將溶血劑加入經(jīng)步驟1)處理后的食蟹猴全血；

3)調(diào)整流式細胞儀各熒光通道電壓，使細胞分為5類，并將該電壓設(shè)置為模板；用流式細胞儀的側(cè)向光和CD45熒光檢測經(jīng)步驟2)處理后的食蟹猴全血，圈出淋巴細胞；

4)用CD4和CD8熒光圈出CD4⁺T淋巴細胞和CD8⁺T淋巴細胞。

9.如權(quán)利要求8所述的食蟹猴淋巴細胞的流式圈門方法，其特征在于，所述CD45抗體、所述CD4抗體或者所述CD8抗體與所述食蟹猴全血的體積比為1:10。

10.如權(quán)利要求8或9所述的流式圈門方法，其特征在于，步驟1)中所述的避光孵育的時長為45min。