[發明專利]一種促進N-乙酰氨基葡萄糖生產的RamA轉錄因子突變體及其應用

有效

• 申請號: 201911361421.6
• 申請日: 2019-12-26
• 公開（公告）號: CN110885364B
• 公開（公告）日: 2021-02-02
• 發明（設計）人: 劉龍;鄧琛;盧健行;劉長峰;盧建功;李江華;堵國成;陳堅
• 申請（專利權）人: 江南大學;山東潤德生物科技有限公司
• 主分類號: C07K14/34
• 分類號: C07K14/34;C12N15/31;C12N1/21;C12N15/77;C12P19/26;C12R1/15
• 代理公司: 蘇州市中南偉業知識產權代理事務所(普通合伙) 32257
• 代理人: 郭磊

1.一種促進N-乙酰氨基葡萄糖生產的RamA轉錄因子突變體，其特征在于，所述的RamA轉錄因子突變體的氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示。

2.根據權利要求1所述的RamA轉錄因子突變體，所述的RamA轉錄因子突變體的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。

3.一種提高N-乙酰氨基葡萄糖產量的基因工程菌，其特征在于，所述基因工程菌是以谷氨酸棒桿菌為宿主菌，過表達權利要求1所述的RamA轉錄因子突變體。

4.根據權利要求3所述的基因工程菌，其特征在于，所述的宿主菌為谷氨酸棒桿菌S9114ΔnagA-ΔgamA-Δldh。

5.根據權利要求3所述的基因工程菌，其特征在于，所述的基因工程菌是以pTYW-4-ceN-C.glglmS為表達載體。

6.一種權利要求3所述的基因工程菌的構建方法，其特征在于，包括如下步驟：

（1）將RamA轉錄因子突變體的編碼基因連接到表達載體pTYW-4-ceN-C.glglmS上，構建pTYW-4-ceN-C.glglmS-RamA載體；

（2）將步驟（1）構建的載體轉入宿主菌谷氨酸棒桿菌S9114ΔnagA-ΔgamA-Δldh，得到所述的基因工程菌。

7.權利要求1所述的RamA轉錄因子突變體或權利要求3所述的基因工程菌在N-乙酰氨基葡萄糖生產中的應用。

8.根據權利要求7所述的應用，其特征在于，所述的應用是將所述的基因工程菌接種至發酵培養基中，28~30℃條件下通氣發酵72~100小時。

9.根據權利要求8所述的應用，其特征在于，所述的發酵培養基為：葡萄糖 90-110 g/L，玉米漿 8-12 g/L, KH₂PO₄ 0.8-1.2 g/L，(NH₄)₂SO₄ 18-22 g/L，MgSO₄ 0.4-0.6 g/L，CaCO₃ 18-22 g/L, FeSO₄ 0.16-0.20 g/L。