[發(fā)明專利]基于GC-HS的丙戊酸鈉中潛在遺傳毒性雜質(zhì)測(cè)定方法

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201911357701.X
• 申請(qǐng)日: 2019-12-25
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN111257440A
• 公開(kāi)（公告）日: 2020-06-09
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 唐檢珍;李朝陽(yáng);萬(wàn)華英
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 四川健能制藥有限公司
• 主分類號(hào): G01N30/02
• 分類號(hào): G01N30/02;G01N30/06;G01N30/16;G01N30/54;G01N30/60
• 代理公司: 重慶輝騰律師事務(wù)所 50215
• 代理人: 王海軍;盧勝斌

本發(fā)明提供了一種基于GC?HS的丙戊酸鈉中潛在遺傳毒性雜質(zhì)測(cè)定方法，具體包括以下步驟：1)供試品溶液的制備；2)對(duì)照品溶液的制備；3)空白溶液的制備；4)測(cè)定方法；用于測(cè)定丙戊酸鈉藥物中潛在的遺傳毒性雜質(zhì)1?溴丙烷含量。在丙戊酸鈉藥物中獲得的平均回收率為97.3％。發(fā)現(xiàn)該方法良好耐用性，可用于測(cè)定丙戊酸鈉中的1?溴丙烷。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及到基于GC-HS的丙戊酸鈉中潛在遺傳毒性雜質(zhì)測(cè)定方法，該方法采用氣相色譜頂空進(jìn)樣法進(jìn)行測(cè)定丙戊酸鈉中潛在的遺傳毒性雜質(zhì)1-溴丙烷。

背景技術(shù)

1-溴丙烷(BP)是丙戊酸鈉合成過(guò)程中使用的起始原料之一，1-溴丙烷可以作為殘留雜質(zhì)存在于最終藥物中。根據(jù)其作為伯烷基鹵化物的結(jié)構(gòu)，1-溴丙烷是具有潛在的致癌雜質(zhì)。1- 溴丙烷的化學(xué)結(jié)構(gòu)如式所示。

丙戊酸鈉為一種不含氮的廣譜抗癲癇藥。本品對(duì)多種方法引起的驚厥，均有不同程度的對(duì)抗作用。對(duì)人的各型癲癇如對(duì)各型小發(fā)作、肌陣攣性癲癇、局限性發(fā)作、大發(fā)作和混合型癲癇均有效。口服吸收快而完全，主要分布在細(xì)胞外液，在血中大部分與血漿蛋白結(jié)合。多用于其它抗癲癇藥無(wú)效的各型癲癇病人，尤以小發(fā)作為最佳。

丙戊酸鈉口服溶液作為抗癲癇藥。其作用機(jī)理尚未完全闡明。實(shí)驗(yàn)見(jiàn)本品能增加GABA 的合成和減少GABA的降解，從而升高抑制性神經(jīng)遞質(zhì)γ-氨基丁酸(GABA)的濃度，降低神經(jīng)元的興奮性而抑制發(fā)作。在電生理實(shí)驗(yàn)中見(jiàn)本品可產(chǎn)生與苯妥英相似的抑制Na+通道的作用。對(duì)肝臟有損害。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供了一種具有測(cè)定準(zhǔn)確，重現(xiàn)性好，操作簡(jiǎn)單、分析速度快的新的丙戊酸鈉中1-溴丙烷的含量測(cè)定方法。

為實(shí)現(xiàn)以上目的，本發(fā)明通過(guò)以下技術(shù)方案予以實(shí)現(xiàn)：丙戊酸鈉中1-溴丙烷的含量測(cè)定方法，包括以下步驟：

色譜條件：以二甲基聚硅氧烷為固定液的毛細(xì)管色譜柱；起始溫度40℃，維持6分鐘，以每分鐘15℃的速率升溫至220℃，維持3分鐘；進(jìn)樣口溫度為220℃；檢測(cè)器溫度為250℃；頂空瓶平衡溫度為80℃，平衡時(shí)間為20分鐘。流速：2.0ml/min；分流比：10:1；載氣：氮?dú)狻?/p>

供試品溶液的制備：取丙戊酸鈉原料約0.2g，精密稱定，置預(yù)先加有0.5g氯化鈉的頂空瓶中，精密加二甲基亞砜0.2ml和水0.8ml溶解，密封，作為供試品液。

對(duì)照品溶液的制備：精密稱取1-溴丙烷對(duì)照品適量，加二甲基亞砜定量稀釋制成每1ml 中約含0.5μg的溶液，精密量取0.2ml，置預(yù)先加有0.5g氯化鈉的頂空瓶中，再精密加水0.8ml，密封，作為對(duì)照品溶液。

空白溶液的制備：精密加入二甲基亞砜0.2ml和水0.8ml，密封，作為空白溶液。

測(cè)定方法：精密量取供試品溶液與對(duì)照溶液分別頂空進(jìn)樣，記錄色譜圖，按外標(biāo)法計(jì)算含量。

附圖說(shuō)明

圖1空白輔料干擾試驗(yàn)空白組；

圖2空白輔料干擾試驗(yàn)對(duì)照組；

圖3正溴丙烷標(biāo)準(zhǔn)曲線圖。

具體實(shí)施方式

為證實(shí)本發(fā)明測(cè)定方法的效果，發(fā)明人進(jìn)行了大量的實(shí)驗(yàn)，并對(duì)最終確定的測(cè)定方法進(jìn)行了科學(xué)的驗(yàn)證，驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)如下：

系統(tǒng)適用性試驗(yàn)

取對(duì)照品溶液頂空進(jìn)樣，平行測(cè)定6份進(jìn)行分析，記錄色譜圖。試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)下表：

表1系統(tǒng)適用性結(jié)果