[發明專利]一種檢測試劑盒及檢測方法

有效

• 申請號: 201911354779.6
• 申請日: 2019-12-25
• 公開（公告）號: CN111007263B
• 公開（公告）日: 2023-10-20
• 發明（設計）人: 趙燕莉;徐雨;吳云飛;田君喜;龍騰鑲
• 申請（專利權）人: 邁克生物股份有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/577;G01N33/543
• 代理公司: 北京睿陽聯合知識產權代理有限公司 11758
• 代理人: 王瑩

本發明公開了一種檢測試劑盒，所述試劑盒包括彼此獨立的試劑1、試劑2和試劑3，所述試劑1中包含單克隆抗體1，所述試劑2中包含單克隆抗體2，所述試劑3中包含抗體3，所述單克隆抗體1、所述單克隆抗體2和所述抗體3針對同一待測抗原，所述抗體3和所述單克隆抗體2針對待測抗原的不同表位，所述抗體3和所述單克隆抗體1針對待測抗原的相同表位或不同表位。本發明還公開了所述檢測試劑盒用于檢測待測抗原的方法，該方法不需要引入樣本稀釋程序，操作簡便快速，檢測結果準確，而且能夠實現全量程檢測。

技術領域

本發明涉及生物技術領域，具體涉及一種檢測試劑盒及檢測方法。

背景技術

C反應蛋白(C-reactive protein，CRP)是急性時相反應蛋白之一，1930年美國洛克菲勒研究院AVERY實驗室的Tillett和Fransic發現急性感染患者的血清能和肺炎雙球菌細胞壁上的C多糖發生沉淀反應，后證實參與反應的是一種蛋白質，故稱之為C反應蛋白。

在組織損傷的急性期，肝臟合成的一些血漿蛋白顯著增加，這些蛋白質通常稱為急性時相蛋白，其中CRP是急性時相蛋白中變化最顯著的一種。CRP在正常人血清中含量極微，在組織受到損傷、炎癥、感染或腫瘤破壞時CRP可以在數小時內急劇上升，可增高數倍或數百倍，2～3天達峰值，待病情改善時逐漸下降，恢復正常。CRP被廣泛用于臨床疾病的早期診斷及鑒別診斷，其升高可見于：組織損傷、感染、腫瘤、心肌梗塞及一系列急慢性炎癥性疾病，如風濕性關節炎、全身性血管炎、多肌痛風濕病；術后感染及并發癥的指標，提示可能并發感染或血栓栓塞，可作為細菌性感染和病毒性感染的鑒別診斷：大多數細菌性感染會引起患者血清CRP升高，而病毒性感染則多數不升高。通常情況下，新生兒血清CRP<2mg/L，兒童和正常成年人血清中CRP≤10mg/L。臨床常規方法測定CRP的方法有免疫沉淀法、免疫濁度法、標記免疫法等，其中以免疫濁度法最常用，檢測的線性范圍一般為3～200mg/L，可用于評價感染、組織損傷和炎癥性疾病。

超敏C反應蛋白(hypersensitive-CRP，hs-CRP)與普通CRP屬同一種蛋白，只是由于其測定方法更敏感而得名。大量研究發現，超敏C反應蛋白是區分低水平炎癥狀態的靈敏指標，可作為心血管疾病風險識別的輔助手段。近年來，檢測hs-CRP的方法有膠乳增強的免疫散色比濁法、免疫透射比濁法、免疫發光法和速率散射免疫比濁法等，檢測低限可至0.005～0.10mg/L，使得低濃度CRP(如0.15～10mg/L)的測定更加準確。

由于普通CRP有較高的線性但靈敏度不好，hs-CRP有較高的靈敏度但線性較低，這樣就出現了同一種待檢物質，兩種檢測名稱。近幾年，隨著檢測技術的發展，開始出現一種全量程C反應蛋白檢測試劑盒，能同時滿足高靈敏度和高線性范圍。目前國內主流全量程C反應蛋白檢測試劑盒與全自動生化分析儀配套使用的主要有膠乳增強免疫比濁、免疫散色比濁和化學發光法。

化學發光法因靈敏度高、特異性好，線性范圍寬被廣泛應用于蛋白質、激素、腫瘤標志物的體外診斷。在發明名稱為“一種C反應蛋白磁微粒檢測試劑盒及其使用方法”的中國專利申請CN201710861832.6中介紹了一種檢測全量程CRP的磁微粒化學發光試劑盒，在0.22～237mg/L范圍內理論值與檢測值有較好的相關性，但需要對待檢樣本進行連續2次稀釋操作，把樣本稀釋100倍后進行檢測。另外，西門子公司的高靈敏度C反應蛋白測定試劑盒(化學發光法)，在0.2～100mg/L范圍內具有較好的相關性，同樣需要把樣本稀釋100倍后進行檢測。由于炎癥患者血清中CRP的含量較高，若用化學發光法對CRP進行全量程檢測，通常需要對樣本進行一定比例的稀釋，然后再檢測。在檢測中引入稀釋程序，會導致檢測通量變小，出結果時間延長，檢測程序繁瑣和基質效應等。如果在化學發光平臺能直接檢測樣本原液，又能實現全量程的要求，則能大大的提高檢測效率和準確度。

專利文獻1：申請號CN 201710861832.6，公開號CN 107656043A。

發明內容