[發明專利]一種檢測試劑盒及檢測方法

有效

• 申請號: 201911354779.6
• 申請日: 2019-12-25
• 公開（公告）號: CN111007263B
• 公開（公告）日: 2023-10-20
• 發明（設計）人: 趙燕莉;徐雨;吳云飛;田君喜;龍騰鑲
• 申請（專利權）人: 邁克生物股份有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/577;G01N33/543
• 代理公司: 北京睿陽聯合知識產權代理有限公司 11758
• 代理人: 王瑩

1.一種檢測試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包括彼此獨立的試劑1、試劑2和試劑3，所述試劑1中包含單克隆抗體1，所述試劑2中包含單克隆抗體2，所述試劑3中包含抗體3，所述單克隆抗體1、所述單克隆抗體2和所述抗體3針對同一待測抗原，所述抗體3和所述單克隆抗體2針對待測抗原的不同表位，所述抗體3和所述單克隆抗體1針對待測抗原的相同表位或不同表位。

2.根據權利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑1中的單克隆抗體1與所述試劑3中的抗體3的濃度比為(0.4～8):(50～200)。

3.根據權利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑1中的單克隆抗體1、所述試劑2中的單克隆抗體2以及所述試劑3中的抗體3的濃度比為(0.4～8):(0.05～0.8):(50～200)。

4.根據權利要求1-3中任一項所述的試劑盒，其特征在于，所述待測抗原為C反應蛋白。

5.根據權利要求4所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑1中包含抗C反應蛋白單克隆抗體，所述試劑2中包含標記物標記的抗C反應蛋白單克隆抗體，所述試劑3中包含抗C反應蛋白抗體；優選地，所述試劑3中包含抗C反應蛋白單克隆抗體。

6.根據權利要求5所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑1中的抗C反應蛋白單克隆抗體包被在磁微粒上；所述磁微粒選自鏈霉親和素磁微粒、甲苯磺?；盼⒘?、羧基磁微粒和氨基磁微粒中的一種。

7.根據權利要求5所述的試劑盒，其特征在于，所述標記物選自辣根過氧化物酶、堿性磷酸酶、β-半乳糖苷酶和吖啶類標記物中的一種，優選為吖啶酯或吖啶磺酰胺。

8.根據權利要求1-7中任一項所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑1、所述試劑2和所述試劑3中還分別包含緩沖液、無機鹽、表面活性劑和/或防腐劑；

優選地，所述緩沖液選自PBS緩沖液、甘氨酸緩沖液、Tris緩沖液、MOPS緩沖液、MES緩沖液、Hepes緩沖液、硼酸緩沖液、醋酸鹽緩沖液和氯化銨緩沖液中的一種或多種；所述無機鹽選自氯化鈉、氯化鉀、氯化鎂、硫酸鎂、氯化鋅和氯化鈣中的一種或多種；所述表面活性劑選自Triton、Tween20、Tween80、NP40、thesit和BrijL2中的一種或多種；和/或，所述防腐劑選自疊氮鈉、苯酚、對羥基苯甲酸和PC系列防腐劑中的一種或多種。

9.權利要求1-8中任一項所述的試劑盒用于檢測待測抗原的方法，其特征在于，包括如下步驟：

(1)將待測樣本與試劑1和試劑3混合，使其充分反應；

(2)洗滌后，加入試劑2，充分反應形成抗體抗原抗體免疫復合物；

(3)第二次洗滌后加入發光底物，測定反應后的相對發光值；

(4)根據相對發光值計算出樣本中的待測抗原的濃度。

10.根據權利要求9所述的方法，其特征在于，步驟(1)中，所述待測樣本與試劑1和試劑3的總體積的體積比在(1:10)～(1:20)之間；優選地，試劑1與試劑3的體積比為1:(1～2)。