[發明專利]一種誘導衛星膠質細胞轉分化為神經元的方法

有效

• 申請號: 201911354423.2
• 申請日: 2019-12-25
• 公開（公告）號: CN110982788B
• 公開（公告）日: 2021-07-06
• 發明（設計）人: 李力燕;馬微;郭建輝;楊金偉;王先斌;劉礦嬪;劉潔;劉偉;臧成昊;吳朕;梁宇;李春艷
• 申請（專利權）人: 昆明醫科大學
• 主分類號: C12N5/0793
• 分類號: C12N5/0793
• 代理公司: 昆明普發諾拉知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 53209
• 代理人: 蔣晗

1.一種誘導衛星膠質細胞轉分化為神經元的方法，其特征在于，所述方法操作如下：取傳代培養后的衛星膠質細胞在含有Anti-proBDNF的誘導培養液中誘導培養3～7天誘導分化為神經元樣細胞，再經神經元培養液繼續培養2～4天后得到成熟神經元；

所述衛星膠質細胞來源于新生大鼠背根神經節，傳代培養3～5代；

所述衛星膠質細胞轉分化為神經元時每1～2天換一次誘導培養液；

所述誘導培養液的配方如下：每50mL DRG-SGCs培養液中DMEM/F12含量為46～48mL，B27細胞培養添加劑含量為0.4～1.2mL，青霉素-鏈霉素混合液含量為0.4～1.2mL，L-谷氨酰胺含量為1.8～2.2mmol/L，BSA含量為15～20mg/mL，NRG1-β1含量為8-12μg/mL，地塞米松含量為22-27μg/mL，Insulin含量為3-7mg/mL，T3含量為8-12μg/mL，T4含量為396-404μg/mL，Anti-proBDNF的濃度為3～5μg/mL；

所述神經元培養液配方如下：青霉素-鏈霉素混合液為0.8～2.2mL，L-谷氨酰胺為0.8-2.2mL，B27細胞培養添加劑為0.8～2.2mL，Neurobasal A神經元基礎培養基為93.4～97.6mL。

2.根據權利要求1所述的誘導衛星膠質細胞轉分化為神經元的方法，其特征在于，所述誘導培養條件如下：在含4.5～5.5％CO₂的溫箱中培養，溫度為36.5～37.5℃，濕度為70％-80％。