[發(fā)明專(zhuān)利]一種薄殼山核桃的微體嫁接方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201911346972.5
• 申請(qǐng)日: 2019-12-24
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN110810251B
• 公開(kāi)（公告）日: 2022-05-13
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 譚鵬鵬;彭方仁;張潔;梁有旺;朱凱凱;周穎
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 南京林業(yè)大學(xué)
• 主分類(lèi)號(hào): A01H4/00
• 分類(lèi)號(hào): A01H4/00;A01G2/30;A01G31/00;A01G24/10;A01G24/15;A01G24/28
• 代理公司: 南京業(yè)騰知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(特殊普通合伙) 32321
• 代理人: 李靜

本發(fā)明涉及一種薄殼山核桃的微體嫁接方法，包括接穗的準(zhǔn)備、砧木的培育以及微體嫁接步驟，首先選取三年生嫁接苗帶腋芽的莖段作為外植體，清洗消毒后切成莖段，接入腋芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基培養(yǎng)，將產(chǎn)生的腋芽轉(zhuǎn)入進(jìn)行繼代培養(yǎng)，選取無(wú)褐化現(xiàn)象、莖長(zhǎng)2～4cm、帶有葉片的、生長(zhǎng)良好的無(wú)根試管苗作為接穗；取成熟薄殼山核桃種子清洗消毒后剝?nèi)》N仁，切取胚軸，誘導(dǎo)培養(yǎng)后作為砧木苗，煉苗5?10d后，采用劈接的方法進(jìn)行嫁接，嫁接后將嫁接苗移至嫁接苗培養(yǎng)基上培養(yǎng)25d，然后解綁，開(kāi)蓋練苗一周后移栽到栽培基質(zhì)中。與現(xiàn)有技術(shù)中薄殼山核桃的嫁接方法相比，本發(fā)明的微體嫁接方法具有嫁接成活率高、成本低、占地面積小，可有效人為操控等優(yōu)點(diǎn)。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種薄殼山核桃的微體嫁接方法，屬于林木育種技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)

薄殼山核桃[Caryaillinoinensis(Wangenh.)K.Koch]又名美國(guó)山核桃或長(zhǎng)山核桃，是胡桃科山核桃屬植物。它原產(chǎn)美國(guó)和墨西哥北部，是世界上著名的干果樹(shù)種之一。其堅(jiān)果個(gè)大、殼薄，出仁率高，取仁容易，產(chǎn)量高。其果仁色美味香、無(wú)澀味、營(yíng)養(yǎng)豐富，是理想的保健食品或面包、糖果等食品的添加材料。薄殼山核桃亦是重要的木本油料植物，種仁油脂含量高達(dá)70％以上，其中不飽和脂肪酸含量高達(dá)97％，是上等的烹調(diào)用油和色拉油。薄殼山核桃還是優(yōu)良的材用和庭園綠化樹(shù)種。薄殼山核桃不僅能為市場(chǎng)提供富含營(yíng)養(yǎng)的干果、優(yōu)質(zhì)的木材等林產(chǎn)品，而且能綠化荒山、荒灘、荒地，美化環(huán)境，集經(jīng)濟(jì)、生態(tài)、社會(huì)三大效益于一身，其多樣的產(chǎn)品已經(jīng)成為改善人民群眾飲食結(jié)構(gòu)和國(guó)民經(jīng)濟(jì)建設(shè)的重要物質(zhì)基礎(chǔ)。

我國(guó)引種薄殼山核桃已有100多年的歷史，但仍未形成大規(guī)模商品化生產(chǎn)，薄殼山核桃傳統(tǒng)的繁殖方法以播種繁殖為主，但是播種實(shí)生苗10-15年后才能正常結(jié)果，由播種至結(jié)果苗齡所需的時(shí)間漫長(zhǎng)，給栽培者造成很大壓力，從而影響了薄殼山核桃種植者的積極性。而且實(shí)生繁殖不易保持其品種的優(yōu)良特性，后代容易發(fā)生性狀分離。因此薄殼山核桃的繁殖方法必須依靠無(wú)性繁殖來(lái)解決，目前薄殼山核桃的無(wú)性繁殖手段主要是嫁接，而嫁接技術(shù)不成熟、嫁接成活率低是限制薄殼山核桃產(chǎn)業(yè)化發(fā)展的主要因素之一(彭方仁，2012)。近年來(lái)，通過(guò)我國(guó)科技工作者的不懈努力，薄殼山核桃的嫁接技術(shù)已有所突破，采用改良的生長(zhǎng)季方塊芽接技術(shù)，可使薄殼山核桃的嫁接成活率達(dá)60％以上(Zhang et al,2015)，但仍然普遍存在枝接成活率不高、不同品種嫁接成活率差異明顯等問(wèn)題(翁春余等,2012)。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于解決現(xiàn)有技術(shù)中薄殼山核桃的嫁接成活率低的問(wèn)題，提供一種薄殼山核桃的微體嫁接方法。

技術(shù)方案

一種薄殼山核桃的微體嫁接方法，包括如下步驟：

(1)接穗的準(zhǔn)備

在薄殼山核桃優(yōu)良品種中，選取三年生嫁接苗帶腋芽的莖段作為外植體，清洗后用70-75v％的乙醇溶液浸泡20-30s，無(wú)菌水沖洗后用0.05-0.1wt％的HgCl₂溶液消毒處理10-15min，然后用無(wú)菌水沖洗，切成1cm長(zhǎng)的莖段，接入腋芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)，培養(yǎng)15-20d后，將產(chǎn)生的腋芽轉(zhuǎn)入繼代培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)，得到無(wú)根試管苗，選取無(wú)污染、無(wú)褐化現(xiàn)象，莖長(zhǎng)2～4cm、帶有葉片的、生長(zhǎng)狀況良好的無(wú)根試管苗作為接穗；

(2)砧木的培育

取成熟薄殼山核桃種子，用自來(lái)水沖洗后浸泡3d，然后在無(wú)菌室內(nèi)用70-75v％的乙醇溶液浸泡20-30s，無(wú)菌水沖洗后用0.05-0.1wt％的HgCl₂溶液消毒處理10-15min，用無(wú)菌水沖洗后置于超凈工作臺(tái)上剝?nèi)ス麣ぃ瑒內(nèi)》N仁放入0.1％HgCl₂溶液中進(jìn)行消毒，從消毒過(guò)的種仁中切取種胚，將其豎直插入種胚誘導(dǎo)培養(yǎng)基，在21-25℃、空氣相對(duì)濕度保持為70-80％、全黑暗的條件下進(jìn)行培養(yǎng)，培養(yǎng)25-30d后，得到組培苗，作為砧木苗；

(3)微體嫁接