[發明專利]一種獲取苔草無菌組培苗的方法

在審

• 申請號: 201911346296.1
• 申請日: 2019-12-24
• 公開（公告）號: CN110959531A
• 公開（公告）日: 2020-04-07
• 發明（設計）人: 崔榮峰;梁芳;董愛香;王茜;張紅艷;董京蓉;苑超;辛海波;張鉞;叢日晨
• 申請（專利權）人: 北京市園林科學研究院
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 北京一枝筆知識產權代理事務所(普通合伙) 11791
• 代理人: 張慶瑞

本發明公開了一種獲取苔草無菌組培苗的方法，涉及苔草培苗技術領域，選擇健康的優良植株，高度控制在3毫米到6毫米，去除植株的頂部葉尖，預處理后，用70％以上的酒精擦拭植體表面，將擦拭后的植體使用清水沖洗20到30分鐘，然后使用無菌水沖洗1到3次，將沖洗后的植體種入初代培養基，每瓶接種2株，獲得苔草無菌苗，初代培養基內部添加9?12mg/L的6?BA、20?30g/L的蔗糖，培養30?40天后轉入下一階段，將幼芽種入繼代培養基，在繼代培養基的內部添加初代培養基的養料，培養20天成苗，將煉苗后的生根組培苗移栽于移栽基質中，培育1?2個月至成苗。該獲取苔草無菌組培苗的方法，具備感染幾率低和高萌發率的優點。

技術領域

本發明涉及苔草培苗技術領域，具體為一種獲取苔草無菌組培苗的方法。

背景技術

苔草，即薹草，是莎草科薹草屬植物。多年生草本植物，具地下根狀莖，稈叢生或散生，三棱形，葉片線形，稀為披針形，小堅果三棱形包于果囊內，全球約2000種，我國苔草屬植物約500種。

薹草屬植物主要觀賞部位為葉片和株型，葉片顏色和形狀豐富多彩，是理想的草坪草種和環境保護植物，對恢復與改善生態環境有重要作用，同時在水土保持、公路綠化、城市園林綠化和運動場草坪建設中具有較高的應用價值，但由于苔草主要為外植體貼近地，極易跟土壤等接觸帶來很多污染源，苔草種子容易感染造，外植體消毒很困難，常規消毒方式污染率極高，培養過程中還會出現內生菌的污染等問題，造成低萌發率，為此我們推出了一種獲取苔草無菌組培苗的方法。

發明內容

本發明的目的是提供一種獲取苔草無菌組培苗的方法，具備感染幾率低和高萌發率的優點，解決了苔草種子具有容易感染和低萌發率的問題。

為實現上述目的，本發明提供如下技術方案：一種獲取苔草無菌組培苗的方法，該方法按以下步驟進行：

S1，采集外植體：選擇遠離地面的植物材料；

S2，消毒：包括流水沖洗1-2小時、在含有抗生素的水中預先水培養、乙醇消毒、次氯酸鈉消毒、升汞消毒中的一種或多種的組合；

S3，抑菌培養：培養基包括羧芐青霉素、頭孢霉素、氨中噻肟頭孢菌素、四環素、利福平或多粘菌素B中的一種或兩者以上的組合；

S4，將步驟S3培養的幼苗煉苗后獲得的生根組培苗移栽于移栽基質中，培育。

進一步的，S1，采集外植體：選擇健康的優良植株，高度控制在3毫米到6毫米，去除植株的頂部葉尖；

S2，消毒：將擦拭后的植體使用清水沖洗60-80分鐘，在含有抗生素的水中預先水培養2-3天，然后再使用70％乙醇消毒2分鐘，5％次氯酸鈉消毒20分鐘或1‰的升汞消毒10分鐘，然后使用無菌水沖洗3-5次；

S3，抑菌培養：將沖洗后的植體種入濃度為250mg/L羧芐青霉素或頭孢霉素的培養基進行培養，在培養基中分別加入濃度為25mg/L的氨中噻肟頭孢菌素、濃度為25mg/L的四環素、濃度為6mg/L的利福平、濃度為6mg/L的多粘菌素B、濃度為9-12mg/L的6-BA、濃度為20-30g/L的蔗糖培養30-40天后轉入下一階段；

S4，苔草芽分化培養：分化培養的培養基為MS+6-BA濃度1.5-2mg/L+NAA濃度0.1-0.2mg/L或MS+6-BA濃度3.5-4mg/L+IAA濃度0.2-0.3mg/L，培養20-25天；

S5，將煉苗后的生根組培苗移栽于移栽基質中，培育1-2個月成苗。

進一步的，步驟S3中所述分化培養的培養基為MS+6-BA1.5 mg/L+NAA 0.1mg/L或MS+6-BA3.5 mg/L+IAA 0.2mg/L。

進一步的，所述抑菌培養光照至少12個小時/天光照，光照強度2000-3100Lx，培養溫度在25-28℃，Ph5.8～6。