[發(fā)明專利]用于治療結腸炎的乳酸菌及其應用

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• 申請日: 2019-12-24
• 公開（公告）號: CN111281895A
• 公開（公告）日: 2020-06-16
• 發(fā)明（設計）人: 顧青;顧容鋮;酈萍;劉娜娜
• 申請（專利權）人: 顧青
• 主分類號: A61K35/747
• 分類號: A61K35/747;A61P1/00;C12N1/20;C12R1/25
• 代理公司: 寧波理文知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 33244
• 代理人: 李高峰;孟湘明

1.一種用于治療結腸炎的乳酸菌，其特征在于，包括：植物乳桿菌ZJ316。

2.根據權利要求1所述的用于治療結腸炎的乳酸菌，其中所述植物乳桿菌ZJ316由嬰兒糞便中篩選。

3.根據權利要求1所述的用于治療結腸炎的乳酸菌，其中所述植物乳桿菌用于治療由DSS誘導的急性和慢性結腸炎小鼠的結腸炎。

4.根據權利要求1所述的用于治療結腸炎的乳酸菌，其中所述植物乳桿菌ZJ316能夠耐受胃酸，能夠通過胃進入腸道。

5.根據權利要求1所述的用于治療結腸炎的乳酸菌，其中在培養(yǎng)植物乳桿菌ZJ316時，將-80℃甘油管凍存的植物乳桿菌ZJ316于MRS固體平板劃線接種，37℃厭氧培養(yǎng)24h復蘇，經兩次傳代活化后轉接于MRS液體，過夜培養(yǎng)菌液16-18h，6000r/min離心10分鐘，收集發(fā)酵上清液，菌泥用濃度為0.85％的滅菌生理鹽水洗滌兩次后，再用生理鹽水重懸，使菌懸液活菌數達約2.5×10⁹CFU/mL。

6.根據權利要求1所述的用于治療結腸炎的乳酸菌，其中所述植物乳桿菌ZJ316用于下調DSS結腸炎小鼠結腸中促炎性細胞因子表達量，并上調抑炎性細胞因子表達量。

7.植物乳桿菌ZJ316或者含有其發(fā)酵乳的一種藥物組合物的制造藥物中的用途，所述藥物用于治療或預防結腸炎。

8.根據權利要求7所述的用途，其中所述植物乳桿菌ZJ316用于下調DSS結腸炎小鼠結腸中促炎性細胞因子表達量，并上調抑炎性細胞因子表達量。

9.根據權利要求7所述的用途，其中在制備發(fā)酵乳時，量取一定量的新鮮牛乳，加入提前制備好的6％的植物乳桿菌ZJ316菌懸液，再加入7％的白砂糖，攪拌均勻后，置于酸奶機發(fā)酵8-12小時。

10.根據權利要求7所述的用途，其中在培養(yǎng)植物乳桿菌ZJ316時，將-80℃甘油管凍存的植物乳桿菌ZJ316于MRS固體平板劃線接種，37℃厭氧培養(yǎng)24h復蘇，經兩次傳代活化后轉接于MRS液體，過夜培養(yǎng)菌液16-18h，6000r/min離心10分鐘，收集發(fā)酵上清液，菌泥用濃度為0.85％的滅菌生理鹽水洗滌兩次后，再用生理鹽水重懸，使菌懸液活菌數達約2.5×10⁹CFU/mL。

11.根據權利要求10所述的用途，其中MRS液體培養(yǎng)基的配制：準確稱取10g蛋白胨，5g酵母提取物，20g無水葡萄糖，10g牛肉膏，2g磷酸氫二鉀，2g檸檬酸氫二銨，5g乙酸鈉，0.2g七水硫酸鎂，0.05g硫酸錳，1mL吐溫-80，用超純水溶解并定容至1L，121℃滅菌15min。

12.根據權利要求10所述的用途，其中MRS固體培養(yǎng)基的配制：在MRS液體培養(yǎng)基配方的基礎上加入1％-1.5％的瓊脂，用超純水溶解并定容至1L，121℃滅菌15min。

13.根據權利要求7所述的用途，其中所述植物乳桿菌ZJ316由嬰兒糞便中篩選。

14.一種用于治療結腸炎的乳酸菌發(fā)酵乳，其特征在于，包括：由植物乳桿菌ZJ316發(fā)酵得到植物乳桿菌ZJ316發(fā)酵乳。

15.根據權利要求14所述的用于治療結腸炎的乳酸菌發(fā)酵乳，其中所述植物乳桿菌ZJ316發(fā)酵乳用于促進DSS結腸炎小鼠結腸中乙酸、丙酸、異丁酸、丁酸和戊酸的含量增加。

16.根據權利要求14所述的用于治療結腸炎的乳酸菌發(fā)酵乳，其中在制備時，量取一定量的新鮮牛乳，加入提前制備好的6％的植物乳桿菌ZJ316菌懸液，再加入7％的白砂糖，攪拌均勻后，置于酸奶機發(fā)酵8-12小時。