[發明專利]一種利用羥基酸脫氫酶制備L-草銨膦的方法

有效

• 申請號: 201911337722.5
• 申請日: 2019-12-23
• 公開（公告）號: CN111019982B
• 公開（公告）日: 2021-10-15
• 發明（設計）人: 楊立榮;周海勝;許金玲;吳堅平;張紅玉
• 申請（專利權）人: 浙江大學
• 主分類號: C12P13/04
• 分類號: C12P13/04
• 代理公司: 杭州天勤知識產權代理有限公司 33224
• 代理人: 沈金龍

1.一種利用羥基酸脫氫酶制備L-草銨膦的方法，其特征在于，以2-羥基-4-(羥基甲基膦酰基)丁酸為原料，經羥基酸脫氫酶和氨基酸脫氫酶兩步催化制備L-草銨膦，

反應體系中加有輔酶，所述輔酶為NAD⁺，反應體系中輔酶的添加量為0.001～0.5mM。

2.如權利要求1所述的方法，其特征在于，所述羥基酸脫氫酶為羥基異己酸脫氫酶、乳酸脫氫酶或扁桃酸脫氫酶中的至少一種。

3.如權利要求2所述的方法，其特征在于，所述羥基酸脫氫酶為來源于甲烷球菌Methanocaldococcus jannaschii DSM 2661的L-羥基異己酸脫氫酶，氨基酸序列SEQ IDNO.1；或來源于德布魯克乳桿菌Lactobacillus delbrueckii的D-羥基異己酸脫氫酶，氨基酸序列SEQ ID NO.2；或來源于鏈球菌Streptococcus的L-乳酸脫氫酶，氨基酸序列SEQ IDNO.3；或來源于短乳桿菌Lactobacillus brevis ATCC 367的D-扁桃酸脫氫酶，氨基酸序列SEQ ID NO.4。

4.如權利要求3所述的方法，其特征在于，反應體系中同時加入L-選擇性羥基酸脫氫酶和D-選擇性羥基酸脫氫酶。

5.如權利要求1所述的方法，其特征在于，所述氨基酸脫氫酶為亮氨酸脫氫酶、丙氨酸脫氫酶或谷氨酸脫氫酶中的至少一種。

6.如權利要求5所述的方法，其特征在于，所述氨基酸脫氫酶為來源于枯草芽孢桿菌Bacillus subtilis 168的亮氨酸脫氫酶，氨基酸序列SEQ ID NO.5；或來源于惡臭假單胞菌Pseudomonas putida KT2440的亮氨酸脫氫酶，氨基酸序列SEQ ID NO.6；或來源于綠色鏈霉菌Streptomyces viridochromogenes DSM40736的丙氨酸脫氫酶，氨基酸序列SEQ IDNO.7；或來源于艱難梭菌Clostridium difficile的谷氨酸脫氫酶，氨基酸序列SEQ IDNO.8。

7.如權利要求1所述的方法，其特征在于，反應體系中所述羥基酸脫氫酶的添加量為不少于100U/L；所述氨基酸脫氫酶添加量為不少于500U/L。

8.如權利要求1所述的方法，其特征在于，反應體系中，原料2-羥基-4-(羥基甲基膦酰基)丁酸的添加量為10～500mM，反應溫度為30～45℃，控制反應pH值為7.5～9。