[發(fā)明專利]一種利用羥基酸脫氫酶制備L-草銨膦的方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201911337722.5 | 申請日： | 2019-12-23 |
| 公開（公告）號： | CN111019982B | 公開（公告）日： | 2021-10-15 |
| 發(fā)明（設計）人： | 楊立榮;周海勝;許金玲;吳堅平;張紅玉 | 申請（專利權）人： | 浙江大學 |
| 主分類號： | C12P13/04 | 分類號： | C12P13/04 |
| 代理公司： | 杭州天勤知識產權代理有限公司 33224 | 代理人： | 沈金龍 |
| 地址： | 310013 浙江*** | 國省代碼： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 利用 羥基 脫氫酶 制備 草銨膦 方法 | ||
1.一種利用羥基酸脫氫酶制備L-草銨膦的方法，其特征在于，以2-羥基-4-(羥基甲基膦酰基)丁酸為原料，經(jīng)羥基酸脫氫酶和氨基酸脫氫酶兩步催化制備L-草銨膦，
反應體系中加有輔酶，所述輔酶為NAD+，反應體系中輔酶的添加量為0.001～0.5mM。
2.如權利要求1所述的方法，其特征在于，所述羥基酸脫氫酶為羥基異己酸脫氫酶、乳酸脫氫酶或扁桃酸脫氫酶中的至少一種。
3.如權利要求2所述的方法，其特征在于，所述羥基酸脫氫酶為來源于甲烷球菌Methanocaldococcus jannaschii DSM 2661的L-羥基異己酸脫氫酶，氨基酸序列SEQ IDNO.1；或來源于德布魯克乳桿菌Lactobacillus delbrueckii的D-羥基異己酸脫氫酶，氨基酸序列SEQ ID NO.2；或來源于鏈球菌Streptococcus的L-乳酸脫氫酶，氨基酸序列SEQ IDNO.3；或來源于短乳桿菌Lactobacillus brevis ATCC 367的D-扁桃酸脫氫酶，氨基酸序列SEQ ID NO.4。
4.如權利要求3所述的方法，其特征在于，反應體系中同時加入L-選擇性羥基酸脫氫酶和D-選擇性羥基酸脫氫酶。
5.如權利要求1所述的方法，其特征在于，所述氨基酸脫氫酶為亮氨酸脫氫酶、丙氨酸脫氫酶或谷氨酸脫氫酶中的至少一種。
6.如權利要求5所述的方法，其特征在于，所述氨基酸脫氫酶為來源于枯草芽孢桿菌Bacillus subtilis 168的亮氨酸脫氫酶，氨基酸序列SEQ ID NO.5；或來源于惡臭假單胞菌Pseudomonas putida KT2440的亮氨酸脫氫酶，氨基酸序列SEQ ID NO.6；或來源于綠色鏈霉菌Streptomyces viridochromogenes DSM40736的丙氨酸脫氫酶，氨基酸序列SEQ IDNO.7；或來源于艱難梭菌Clostridium difficile的谷氨酸脫氫酶，氨基酸序列SEQ IDNO.8。
7.如權利要求1所述的方法，其特征在于，反應體系中所述羥基酸脫氫酶的添加量為不少于100U/L；所述氨基酸脫氫酶添加量為不少于500U/L。
8.如權利要求1所述的方法，其特征在于，反應體系中，原料2-羥基-4-(羥基甲基膦酰基)丁酸的添加量為10～500mM，反應溫度為30～45℃，控制反應pH值為7.5～9。
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