[發明專利]用于廢水處理的復合微生物菌劑的制備方法

在審

• 申請號: 201911337053.1
• 申請日: 2019-12-23
• 公開（公告）號: CN110964687A
• 公開（公告）日: 2020-04-07
• 發明（設計）人: 肖海燕;薛薇;黃華;朱敬華;王永樂;李蕊;夏冬
• 申請（專利權）人: 天津市工業微生物研究所有限公司;天津實發中科百奧工業生物技術有限公司;天津量信檢驗認證技術有限公司
• 主分類號: C12N1/36
• 分類號: C12N1/36;C12N1/20;C02F3/34;C02F101/36;C12R1/38;C12R1/085;C12R1/01;C12R1/07
• 代理公司: 天津盛理知識產權代理有限公司 12209
• 代理人: 霍慧慧

本發明涉及一種用于廢水處理的復合微生物菌劑的制備方法，其特征在于：制備步驟為：(1)原位系統菌群的增殖培養；(2)原位系統菌群的馴化篩選；(3)原位系統菌種的分離鑒定；(4)原位系統宏基因組鑒定及優勢菌判定；(5)優勢菌種的復配與擴大培養；(6)微生物菌劑的制成與保藏。本發明設計科學合理，分離篩選得到的原位系統優勢微生物經擴大培養和復配后，對原位系統廢水適應能力超強，微生物間共生關系和諧，生物處理效率高，對廢水中的有機物降解性強，顯示出高效、快速和實用等特點，大大提高工作的便捷性。本發明不僅可以應用于廢水生物處理菌劑的制備，還可以推廣到其他固體廢棄物、廢氣及土壤的生物處理、生物修復菌劑的制備。

技術領域

本發明屬于廢水處理技術領域，涉及有效降解工業廢水的特定復合微生物菌劑的培養方法，特別涉及一種用于廢水處理的復合微生物菌劑的制備方法。

背景技術

工業廢水大多屬于成分復雜、有一定毒害性的難降解有機廢水，但大多工業廢水中都棲息生長著一定數量的特定優勢微生物，這些微生物由于長期受到廢水的馴化和篩選，共生關系和諧穩定，存活的都具有非常出色的適應能力和降解能力。通過一定的生物技術手段，增殖并分離得到這些特定的微生物菌群，按照特定環境樣品中宏基因組的鑒定結果，將主要的微生物復配成菌劑，再利用這種特定的微生物菌劑強化工業廢水的生物處理系統，是生物法處理工業廢水的一條重要途徑，具有很好的實用價值。

發明內容

本發明的目的在于提供一種用于廢水處理的復合微生物菌劑的制備方法，該方法的菌種適應性更強，降解效果更顯著，處理效率更高，使用更加便捷，對相關領域特定優勢微生物的獲得具有很好的借鑒和推廣價值。

本發明解決其技術問題是通過以下技術方案實現的：

一種用于廢水處理的復合微生物菌劑的制備方法，其特征在于：所述制備方法的步驟為：

(1)原位系統菌群的增殖培養：配制增殖培養基并調節pH近中性，分裝于 250mL錐形瓶中，增殖好氧微生物時，每瓶裝100mL；增殖兼氧微生物時，每瓶裝 200mL；將6～8％的廢水或3～5％的相應污泥接入增殖培養基中，在30～35℃條件下，好氧微生物采用振蕩培養，搖床轉速110～160r/min，培養時間約20～30小時；兼氧微生物群采用靜置培養，定時搖動，培養時間約20～30小時；

(2)原位系統菌群的馴化篩選：以不同濃度的廢水作為碳源，根據廢水特點調節C/N，適當添加無機鹽配制成篩選培養基，分裝于錐形瓶中，接入步驟(1)的菌種，培養方法同步驟(1)；馴化從低到高逐步提高廢水濃度，馴化時間72～80小時，最后在8000～10000r/15min條件下離心收集，得到馴化好的優勢菌群；

(3)原位系統菌種的分離鑒定：將增值、篩選馴化得到的優勢微生物菌群進行 10^-9～10^-1梯度的稀釋，取一定稀釋濃度的懸濁液，進行平板涂布或劃線，在30～35℃條件下培養，挑取單菌落并轉接斜面再進行培養，對分離純化出的菌種進行16s rDNA 基因高通量測序鑒定；

(4)原位系統宏基因組鑒定及優勢菌判定：取原位系統中的廢水及污泥為樣品，進行宏基因組鑒定，得到原位系統中主要微生物種類和分布占比關系，并以此為復配微生物菌劑的依據；

(5)優勢菌種的復配與擴大培養：根據步驟(3)及(4)的鑒定結果，將分離純化得到的主要菌種按占比關系進行復配，得到微生物菌劑的配方，再將這些主要菌種進行擴大培養，接種量為5～10％，裝液率為70～75％，在30～35℃條件下，好氧微生物采用通風攪拌培養，通風比1:0.3～1；兼氧微生物采用靜置培養，定時搖拌，培養時間約20～30小時；

(6)微生物菌劑的制成與保藏：將步驟(5)擴培的不同菌種的培養液按配方混合，再添加0.2～0.5％的吸附保護劑，混勻后制成菌劑，菌種的保藏是將培養得到的菌液離心收集，逐一做成凍干管長期保存，短期使用時將菌體在4℃條件下保藏，三個月內使用。