[發明專利]一種培養基及其用于檢測大腸桿菌的應用

有效

• 申請號: 201911336943.0
• 申請日: 2019-12-23
• 公開（公告）號: CN110819689B
• 公開（公告）日: 2021-09-21
• 發明（設計）人: 劉玲;董銘;董紹俊
• 申請（專利權）人: 中國科學院長春應用化學研究所
• 主分類號: C12Q1/10
• 分類號: C12Q1/10;C12Q1/06;C12Q1/04;C12R1/19
• 代理公司: 長春眾邦菁華知識產權代理有限公司 22214
• 代理人: 周蕾

1.一種培養基，其適用于4-甲基傘形酮-β-D-葡萄糖醛酸苷（MUG）為信號分子的大腸桿菌檢測；營養物為胰蛋白胨；

其特征在于，

鹽溶液，其組成成分如下：

磷酸鹽緩沖溶液：每升含量包括磷酸二氫鉀10 g、磷酸氫二鉀25 g、磷酸氫二鈉20 g和氯化銨2 g；

硫酸鎂溶液，每升含量11 g；

氯化鈣溶液，每升含量28 g；

氯化鐵溶液，每升含量0.15 g；

所述4-甲基傘形酮-β-D-葡萄糖醛酸苷 （MUG），其質量濃度為7.5 mg /L；

所述胰蛋白胨，其質量濃度為10 g/L；

所述鹽溶液的組成成分各1 mL/L。

2.根據權利要求1所述的培養基，其特征在于，當檢測的實際樣品中存在真菌或革蘭氏陽性菌時，所述培養基添加兩性霉素 B或茄屬植物萃取物或膽鹽。

3.根據權利要求2所述的培養基，其特征在于，1L培養基中添加兩性霉素 B為 1 mg、或茄屬植物萃取物為500 mg、或膽鹽為1.5g。

4.一種權利要求1所述的培養基用于檢測大腸桿菌的應用。

5.根據權利要求4所述的培養基用于檢測大腸桿菌的應用，其特征在于，使用所述培養基用于檢測大腸桿菌，包括以下步驟：

步驟1、按照配方配制培養基；

步驟2、以無菌操作接種大腸桿菌于純培養基中，培養至穩定期，經過稀釋為系列濃度梯度后用于制備標準曲線；

步驟3、將步驟2的菌液用標準平板計數法（CFU）定量得到純培養大腸桿菌的真實濃度；

步驟4、將步驟2的菌液接種于步驟1制備的培養基中，由步驟3的CFU定量結果計算各菌液中含有大腸桿菌數量；

步驟5、接種實際待測樣品于步驟1制備的培養基中并添加兩性霉素 B或茄屬植物萃取物或膽鹽；

步驟6、將步驟4和步驟5 的培養基于35-44℃溫育6-19 h，測量熒光強度，激發366nm，讀取450nm處發射峰峰值；

步驟7、根據步驟4測得的大腸桿菌數量、及步驟6測得的發射峰峰值，繪制標準曲線；將步驟5和步驟6測得的峰值帶入標準曲線，計算得出待測樣品中大腸桿菌的濃度。

6.根據權利要求5所述的培養基用于檢測大腸桿菌的應用，其特征在于，步驟5中1L培養基中添加兩性霉素 B 1 mg，或茄屬植物萃取物500 mg，或膽鹽1.5g。