[發(fā)明專利]巴氏染色試劑盒及其染色方法

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201911334765.8
• 申請(qǐng)日: 2019-12-23
• 公開（公告）號(hào): CN110926909A
• 公開（公告）日: 2020-03-27
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王守立;趙飛;沈剛
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 蘇州堪賽爾生物技術(shù)有限公司
• 主分類號(hào): G01N1/31
• 分類號(hào): G01N1/31
• 代理公司: 蘇州隆恒知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 32366
• 代理人: 周子軼

本發(fā)明公開了一種巴氏染色試劑盒及其染色方法。所述巴氏染色試劑盒包括蘇木素染液、伊紅染液和橘黃G染液，其中，伊紅染液的PH值控制在6.5～6.8之間，從而使得伊紅染液在弱酸環(huán)境下進(jìn)行染色，提高了伊紅染液的著色力。采用本發(fā)明提供的方案，可以縮短了細(xì)胞涂片從固定到染色以及封片所需的時(shí)間，提高檢測(cè)效率，由于染色后細(xì)胞結(jié)構(gòu)分明，進(jìn)一步提高了檢測(cè)效率，降低檢測(cè)難度。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及了體外診斷領(lǐng)域，具體的是一種巴氏染色試劑盒及其染色方法。

背景技術(shù)

巴氏(Papanicolaou)染色法是病理切片和脫落細(xì)胞染色中最常用的染色方法，該染色法不但具有顯示細(xì)胞核結(jié)構(gòu)清晰，分色明顯，透明度好，胞漿受色鮮艷等特點(diǎn)，而且所染標(biāo)本不易脫色，可長久保存。

傳統(tǒng)的巴氏染色試劑盒成分復(fù)雜，染色手續(xù)繁雜，時(shí)間較長且難以掌握。因而檢驗(yàn)技術(shù)人員普遍感到操作難度大。

發(fā)明內(nèi)容

為了克服現(xiàn)有技術(shù)中的缺陷，本發(fā)明實(shí)施例提供了一種巴氏染色試劑盒及其染色方法，其用于解決上述問題中的至少一種。

本申請(qǐng)實(shí)施例公開了：一種巴氏染色試劑盒，包括蘇木素染液、伊紅染液和橘黃G染液，其中，

所述蘇木素染液的配制方法包括：將2g蘇木素加入250ml 95％乙醇中得到蘇木素酒精液；將17g硫酸鋁鉀加入750ml蒸餾水中，攪拌使其完全溶解得到硫酸鋁鉀溶液；將所述蘇木素酒精液加入所述硫酸鋁溶液中，并向溶液中加入0.2g碘酸鈉；再向前述溶液中加入體積濃度為95.5％的冰醋酸20ml；

所述伊紅染液的配制方法包括：

將2.5g淡綠溶于5ml蒸餾水中得到淡綠溶液，再將所述淡綠溶液加入500ml無水乙醇中得到淡綠酒精液；

將0.5g俾士麥棕加入5ml蒸餾水中得到俾士麥棕溶液，再將所述俾士麥棕加入100ml無水乙醇中得到俾士麥棕酒精液；

將2.5g伊紅加入500ml、95％乙醇中得到伊紅酒精液；

取45ml所述淡綠酒精液、10ml所述俾士麥棕酒精液和45ml所述伊紅酒精液進(jìn)行混合，再向混合液中加入0.2g磷鎢酸，得到伊紅染液；

所述橘黃G染液的配制方法包括：

將0.5g桔黃G溶于5ml蒸餾水中得到桔黃溶液，再向所述桔黃溶液中加入100ml無水乙醇，得到橘黃G染液。

具體的，所述巴氏染色試劑盒中包括20ml所述蘇木素染液、20ml所述伊紅染液和20ml所述橘黃G染液。

具體的，所述伊紅染液的配制方法中還包括：向所述伊紅染液中加入數(shù)滴碳酸鋰飽和溶液。

具體的，加入所述碳酸鋰飽和溶液后的所述伊紅染液的PH值為6.5～6.8之間。

具體的，所述橘黃G染液的配制方法中還包括：向所述橘黃G染液中加入0.015g磷鎢酸。

本申請(qǐng)實(shí)施例還公開了：一種采用本實(shí)施例中的巴氏染色試劑盒染色的方法，包括以下步驟：

a.將已固定的細(xì)胞涂片浸入酒精中3min，然后水洗；

b.將步驟a中獲得的細(xì)胞涂片浸入蘇木素染液中2min，然后采用流水沖洗5min；

c.將步驟b中獲得的細(xì)胞涂片依次浸入75％、85％、95％酒精中各40s，以進(jìn)行脫水；

d.將步驟c中獲得的細(xì)胞涂片浸入橘黃G染液中1～2min；

e.將步驟d中獲得的細(xì)胞涂片放入95％酒精中浸洗2次；

f.用伊紅染液對(duì)步驟e中獲得的細(xì)胞涂片進(jìn)行染色4～8min；