[發明專利]巴氏染色試劑盒及其染色方法在審
| 申請號： | 201911334765.8 | 申請日： | 2019-12-23 |
| 公開（公告）號： | CN110926909A | 公開（公告）日： | 2020-03-27 |
| 發明（設計）人： | 王守立;趙飛;沈剛 | 申請（專利權）人： | 蘇州堪賽爾生物技術有限公司 |
| 主分類號： | G01N1/31 | 分類號： | G01N1/31 |
| 代理公司： | 蘇州隆恒知識產權代理事務所(普通合伙) 32366 | 代理人： | 周子軼 |
| 地址： | 215000 江蘇省蘇州市工業*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 染色 試劑盒 及其 方法 | ||
1.一種巴氏染色試劑盒，其特征在于，包括蘇木素染液、伊紅染液和橘黃G染液，其中，
所述蘇木素染液的配制方法包括：將2g蘇木素加入250ml 95％乙醇中得到蘇木素酒精液；將17g硫酸鋁鉀加入750ml蒸餾水中，攪拌使其完全溶解得到硫酸鋁鉀溶液；將所述蘇木素酒精液加入所述硫酸鋁溶液中，并向溶液中加入0.2g碘酸鈉；再向前述溶液中加入體積濃度為95.5％的冰醋酸20ml；
所述伊紅染液的配制方法包括：
將2.5g淡綠溶于5ml蒸餾水中得到淡綠溶液，再將所述淡綠溶液加入500ml無水乙醇中得到淡綠酒精液；
將0.5g俾士麥棕加入5ml蒸餾水中得到俾士麥棕溶液，再將所述俾士麥棕加入100ml無水乙醇中得到俾士麥棕酒精液；
將2.5g伊紅加入500ml、95％乙醇中得到伊紅酒精液；
取45ml所述淡綠酒精液、10ml所述俾士麥棕酒精液和45ml所述伊紅酒精液進行混合，再向混合液中加入0.2g磷鎢酸，得到伊紅染液；
所述橘黃G染液的配制方法包括：
將0.5g桔黃G溶于5ml蒸餾水中得到桔黃溶液，再向所述桔黃溶液中加入100ml無水乙醇，得到橘黃G染液。
2.根據權利要求1所述的巴氏染色試劑盒，其特征在于，所述巴氏染色試劑盒中包括20ml所述蘇木素染液、20ml所述伊紅染液和20ml所述橘黃G染液。
3.根據權利要求1所述的巴氏染色試劑盒，其特征在于，所述伊紅染液的配制方法中還包括：向所述伊紅染液中加入數滴碳酸鋰飽和溶液。
4.根據權利要求3所述的巴氏染色試劑盒，其特征在于，加入所述碳酸鋰飽和溶液后的所述伊紅染液的PH值為6.5～6.8之間。
5.根據權利要求1所述的巴氏染色試劑盒，其特征在于，所述橘黃G染液的配制方法中還包括：向所述橘黃G染液中加入0.015g磷鎢酸。
6.一種采用如權利要求1-5中任意一項所述的巴氏染色試劑盒染色的方法，其特征在于，包括以下步驟：
a.將已固定的細胞涂片浸入酒精中3min，然后水洗；
b.將步驟a中獲得的細胞涂片浸入蘇木素染液中2min，然后采用流水沖洗5min；
c.將步驟b中獲得的細胞涂片依次浸入75％、85％、95％酒精中各40s，以進行脫水；
d.將步驟c中獲得的細胞涂片浸入橘黃G染液中1～2min；
e.將步驟d中獲得的細胞涂片放入95％酒精中浸洗2次；
f.用伊紅染液對步驟e中獲得的細胞涂片進行染色4～8min；
g.將步驟f中獲得的細胞涂片放入95％酒精中浸洗2次，再置于無水乙醇中脫水，接著置于二甲苯中洗滌透明，接著，采用中性樹膠對透明后的細胞涂片進行封片。
7.根據權利要求6所述的方法，其特征在于，所述步驟a包括：將已固定的細胞涂片依次浸入80％、70％、50％酒精中各1min，然后水洗。
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