[發明專利]一種組織脫鈣液及其制備方法、應用方法

有效

• 申請號: 201911334720.0
• 申請日: 2019-12-23
• 公開（公告）號: CN111060373B
• 公開（公告）日: 2023-03-28
• 發明（設計）人: 王守立;趙飛;沈剛
• 申請（專利權）人: 蘇州堪賽爾醫學檢驗有限公司
• 主分類號: G01N1/30
• 分類號: G01N1/30
• 代理公司: 蘇州隆恒知識產權代理事務所(普通合伙) 32366
• 代理人: 周子軼

本發明公開了一種組織脫鈣液及其制備方法、應用方法，組織脫鈣液的制備方法，包括以下步驟：將40～60份甲酸、3～5份乙酸以及140～180份10％福爾馬林混合均勻得到a液；將38～44份多聚甲醛、36～42份植物源性有機酸以及800～900份水混合均勻得到b液；將a液和b液混合均勻即得所述組織脫鈣液。組織脫鈣方法包括以下步驟：將骨組織切為1.5cm×1.0cm×0.3cm的骨組織標本，再將骨組織標本置于裝有組織脫鈣液的密閉容器中，進行微波輻射脫鈣；將微波輻射脫鈣后的骨組織標本取出用流水清洗30min，然后進行脫水、包埋、切片和染色。本發明組織脫鈣液及其制備方法、應用方法，其24h即可完成脫鈣處理，脫鈣速率較快，并且脫鈣處理的效果較好，能使骨組織完全脫鈣。

技術領域

本發明涉及了生物技術領域，具體的是一種組織脫鈣液及其制備方法、應用方法。

背景技術

病理實驗制作切片時，經常碰到一些含鈣組織，而且鈣十分堅硬。由于組織中的鈣和石蠟之間的密度不同，含鈣的組織一般不能直接制作切片，而是需要經過脫鈣處理，再進行切片。脫鈣是組織切片的重要環節。

對組織脫鈣時，需要達到充分脫鈣，但同時也需要保護組織不受到較嚴重的破壞。現有的組織脫鈣液，多使用一些強有機酸，或是鹽酸、硝酸等無機酸，這些酸可以在短時間內除去大量的鈣，但同時對組織形態的破壞性較強，尤其是對于一些細小組織，根本不適用。

因此，有必要針對現有技術中的組織脫鈣液做出進一步的改進，以在保持較好脫鈣性能的同時能夠降低其對組織的破壞性。

發明內容

為了克服現有技術中的缺陷，本發明實施例提供了一種組織脫鈣液及其制備方法、應用方法，其24h即可完成脫鈣處理，脫鈣速率較快，并且脫鈣處理的效果較好，能使骨組織完全脫鈣。脫鈣處理后的骨組織切片完整、無明顯刀痕，且HE染色核質清晰、胞漿鮮艷。

本發明公開了一種組織脫鈣液，以重量份計，包括以下成分：

多聚甲醛38～44份、

甲酸40～60份、

乙酸3～5份、

植物源性有機酸36～42份、

10％福爾馬林140～180份、

水800～900份。

作為優選，所述植物源性有機酸的制備方法包括如下步驟：

步驟一：將溪黃草洗凈并干燥，將干燥后的溪黃草粉碎成100目的粉末狀，然后干燥至恒重；

步驟二：取步驟一中干燥至恒重的溪黃草粉末與60wt％～80wt％的乙醇混合均勻，然后水浴加熱，回流提取3次，合并提取液；

步驟三：將步驟二中的提取液減壓濃縮至體積減半，再調節pH至11.0得到堿水液，用乙酸乙酯萃取5次，去除乙酸乙酯，留下萃取后的堿水液，再將堿水液pH調節至2.5，用乙酸乙酯再次萃取5次，收集乙酸乙酯萃取液，減壓回收乙酸乙酯，將剩余物真空干燥即得所述植物源性有機酸。

進一步優選，所述植物源性有機酸的制備方法步驟二中溪黃草粉末與乙醇按照料液比1:(10～15)混合。

進一步優選，所述植物源性有機酸的制備方法步驟二中水浴加熱的溫度為80～90℃，回流提取時每次提取的時間為2～3h。

本發明還公開了一種組織脫鈣液的制備方法，所述制備方法包括以下步驟：

將40～60份甲酸、3～5份乙酸以及140～180份10％福爾馬林混合均勻得到a液；

將38～44份多聚甲醛、36～42份植物源性有機酸以及800～900份水混合均勻得到b液；

將所述a液和所述b液混合均勻即得所述組織脫鈣液。