[發明專利]一種以茶葉為原料制備小分子肽的方法

有效

• 申請號: 201911327355.0
• 申請日: 2019-12-20
• 公開（公告）號: CN111088308B
• 公開（公告）日: 2023-04-07
• 發明（設計）人: 蘭海崇
• 申請（專利權）人: 遵義陸圣康源科技開發有限責任公司
• 主分類號: C12P21/06
• 分類號: C12P21/06
• 代理公司: 貴州派騰知識產權代理有限公司 52114
• 代理人: 周黎亞

本發明涉及分子肽制作技術領域，具體是一種以茶葉為原料制備小分子肽的方法，包括如下步驟：1)冷凍處理；2)電磁波溶脹；3)真空擠壓膨化；4)酶解；5)高壓均質；本發明方法具有酶解效率高，分子肽提取率高、酶解時間短，分子肽純度好，小分子肽的生物活性、生物相容性等得到有效保障，茶葉資源得到充分利用。

技術領域

本發明涉及分子肽制作技術領域，具體是一種以茶葉為原料制備小分子肽的方法。

背景技術

茶葉中富含茶多酚、茶多酚、茶多糖、蛋白質、纖維素類等成分，均發揮不同的藥用價值，如生津止渴、清涼降火、抗氧化、調節血脂等。有的研宄表明，茶葉中蛋白質含量約15％～30％(以干重計算)，其中約80％為谷蛋白，14％為醇溶蛋白，3.5％為白蛋白和約1％為球蛋白，大部分呈水難溶的狀態，因此，傳統茶葉的使用方法不能夠使得茶葉蛋白充分溶出，雖然近些年的研宄相繼報道茶葉蛋白的生物活性主要有抗氧化、抗誘變等，報道茶葉蛋白的種類主要有糖蛋白、多酚氧化酶等，但分子量大或者以多聚體狀態存在，這使得茶葉蛋白的吸收利用率低。

小分子肽是由兩個及以上的氨基酸以肽鍵相連的一種蛋白質片段，具有易吸收的特點，小分子肽早已成為藥食品、保健品、日用化妝品等領域的開發熱點。如專利號CN201710695843.1公開了一種石斛小分子肽及其制備方法，采用木聚糖酶、纖維素酶、堿性蛋白酶以及植物蛋白酶進行復合生物酶切的方式提取小分子肽；又如專利號CN201811609136.7公開了一種仿生法制備功能性蛋白多肽的方法，以天然植物蛋白為原料，利用非動物源性蛋白酶，模擬動物消化過程，生產酶解蛋白多肽。包括：將植物蛋白原料預粉碎，加水調制，采用非動物源性復合蛋白酶A、木瓜蛋白酶和菠蘿蛋白酶進行一次酶解，再加入復合蛋白酶B、賴氨酸氨肽酶和羧肽酶進行二次酶解，制得二次酶解蛋白漿液，然后均質、噴霧干燥、滅菌，即得；但關于茶葉蛋白制備小分子肽的研究鮮見，并且茶葉蛋白中連接鍵種類報道較少，以及多肽發生自組裝的影響因子通常有溫度、pH、離子強度、反應時間等，而酶解過程中液伴隨著上述影響因子的變化，這使得小分子肽的生物活性、生物相容性等受到抑制，造成酶解時間長、提取率低、穩定性不理想。

鑒于夏秋茶供求量大，造成茶渣增多以及秋冬季茶園修剪的遺棄茶葉也較多，研究和開發茶葉蛋白質資源具有重要的現實意義。

發明內容

為了解決現有技術中存在的上述技術問題，本發明提供一種以茶葉為原料制備小分子肽的方法，具體如下：

一種以茶葉為原料制備小分子肽的方法，包括如下步驟：

1)冷凍處理：將茶葉與改性β-環糊精按質量比10：(0.03～0.07)?的比例混合后，置于溫度-17～-9℃條件下冷凍存儲20～30min；

2)電磁波溶脹：將步驟1)所得物與礦物質溶液按質量比1：(2～?4)的比例混合后，進行電磁波溶脹處理15～25min；

3)真空擠壓膨化：將步驟2)所得物經真空擠壓膨化處理10～?20min后，在3～5min內冷卻至室溫，然后研磨至過80目篩；

4)酶解：將步驟3)所得物與去離子水按質量比1：(5～7)的比例混合后，加入茶葉重量0.01～0.05％的復合酶進行酶解，過濾，取濾液；

5)高壓均質：濾液在75～95MPa條件下均質處理后，冷凍干燥，即得小分子肽。

本發明中茶葉為采摘后的鮮葉、茶園修剪的遺棄茶葉、浸泡后遺棄茶葉中的任意一種或幾種。

所述改性β-環糊精的制備方法為：取3gβ-環糊精，用去離子水定容至100mL，然后加入20mg維生素E，在溫度為45～55℃條件下磁力攪拌20～30min后，再置于70～80℃條件下干燥。

所述礦物質溶液由如下質量百分數組分組成：海藻酸鈉11～?17％、酒石酸7～13％、磷酸三鈉14～22％，余量為水。